论文部分内容阅读
目的：银屑病(psoriasis)是一种表皮细胞异常增殖及角化不全的慢性炎症性皮肤病，临床主要表现为易发于头皮，四肢伸侧及骶尾部的大小不等红色鳞屑性丘疹、斑块，有特异的薄膜现象和点状出血，多数患者有瘙痒症状。依据不同的临床表现一般分为寻常型、关节病型、脓疱型和红皮病型，其中以寻常型最为多见。按照病程发展又可将寻常型银屑病进行不同的分期。该病诊断一般较容易，但发病机制和治疗方法一直是困扰临床医师的问题。以往研究多认为银屑病是一种T淋巴细胞相关的自身免疫性疾病，其中Th1细胞的过度活化在发病中起重要作用。近来，在类风湿关节炎、实验性自身免疫性脑脊髓炎等自身免疫病和过敏原特异性反应研究中发现了一种区别于传统的Th1和Th2型的辅助型T细胞，命名为Th17细胞。该类细胞亚群除了特殊产生白介素17(interleukin17，IL-17)因子外，还能分泌IL-21、IL-22、IL-6等细胞因子，在自身免疫性疾病中发挥重要免疫调节作用。从Th17细胞发现时起，大量学者就一直在积极研究其在自身免疫性疾病中的作用。作为皮肤科常见病，有关银屑病的研究备受关注，更多有关Th17细胞及其效应因子在银屑病发病中的作用成为皮肤科研究热点。本实验通过检测寻常型银屑病患者外周血中Th17细胞（CD4~+IL17~+T细胞）及血清中白介素-17(interleukin17，IL-17)的表达水平并与健康志愿者作对照，研究Th17细胞及其分泌的效应因子IL-17的表达水平与寻常型银屑病发病的关联以及对疾病严重程度的影响，进一步探讨研究银屑病的发病机理，为临床治疗提供新思路，不仅具有学术价值而且具有应用前景。方法：病例组选择寻常型银屑病患者23例，均来自2011年3月至2011年12月期间就诊于河北医科大学第二医院皮肤科门诊的患者。入选标准：1有典型的寻常型银屑病皮疹表现；2近1月内未接受过激素及免疫抑制剂系统性治疗；3除外自身免疫性疾病以及其它慢性系统性疾病。其中男12例，女11例，年龄19～53岁，平均年龄33.30±11.30岁。根据病情将病例组分为进行期组12例和稳定期组11例。并由同一工作人员依据临床表现进行PASI评分。以11例本院健康医护人员为对照组，其中男5例，女6例。年龄20～52岁，平均年龄(27.27±8.63)岁，经t检验，性别、年龄与病例组无显著差异。1外周血Th17细胞的检测：采集23例银屑病患者及11例健康对照者静脉血4ml放入肝素抗凝管中，8小时内分离出外周血单个核细胞（PBMC）并加入PMA、离子霉素、莫能霉素置于37度5%二氧化碳孵箱中共刺激4小时，然后固定破膜，进行表面及胞内细胞因子染色。最后用流式细胞术（FCM）测定Th17(CD4~+IL-17~+T)细胞在外周血淋巴细胞中的比例。将病例组和正常对照组以及进行期组和稳定期组之间的差别分别进行统计学分析，另外对病例组中测得的Th17细胞的表达水平与临床皮损面积和严重程度(PASI评分值)之间的关系进行统计学相关性分析。2血清中白介素-17的检测：另外抽取23例病例组及11例健康对照组静脉血2ml放入EDTA抗凝管，离心收集血清标本置于-20℃的冰箱中保存。将以上收集到的所有病例组及对照组的血清一并应用双抗体夹心ELISA法检测血清标本中IL-17的表达水平。同样将病例组和正常对照组以及进行期组和稳定期组之间的差别分别进行统计学分析，对于寻常型银屑病患者血清中IL-17的表达水平与临床皮损面积和严重程度(PASI评分值)之间的关系进行统计学相关性分析。结果：1流式细胞术检测结果示病例组外周血中Th17细胞所占比例为(2.09±1.53)%高于正常对照组的(0.96±1.02)%，差异有统计学意义(t=2.22P=0.03P<0.05)；其中进行期组为(2.14±1.72)%，与稳定期组(2.04±1.39)%相比差异无统计学意义(t=0.16P=0.87P＞0.05)；外周血Th17细胞的表达水平与皮损面积及严重程度(PASI评分值)无相关关系(r=-0.22P=0.31P＞0.05)。2双抗体夹心ELISA法检测结果显示寻常型银屑病血清中IL-17表达水平为30.85±11.52高于正常对照组的21.87±9.99差异有统计学意义(t=2.21P=0.03P<0.05)；进行期组为32.07±10.75与稳定期组29.51±12.69相比差异无统计学意义(t=0.52P=0.61P＞0.05)；血清中IL-17表达水平与皮疹面积和严重程度（PASI评分值）无相关关系(r=0.27P=0.22P＞0.05)。结论：1寻常型银屑病患者外周血Th17细胞的表达水平高于正常对照，说明Th17细胞可能参与了银屑病的发病过程，直接反映出Th17细胞在寻常型银屑病的发病中可能具有重要作用。2寻常型银屑病患者血清中IL-17的表达水平高于正常对照组，说明Th17细胞的效应因子IL-17可能参与了银屑病的发病过程，间接证明了Th17细胞与寻常型银屑病的发病可能有关联。3寻常型银屑病患者外周血Th17细胞及血清中IL-17的表达水平在进行期与稳定期相比均无明显差别，说明Th17细胞及IL-17因子可能影响了银屑病整个发病过程，Th17细胞和IL-17因子的表达水平不能反映发病时期。4寻常型银屑病患者外周血中Th17细胞及血清中IL-17的表达水平与银屑病的皮疹面积与严重程度（PASI）评分值无相关性关系，说明Th17细胞及其分泌的IL-17因子与银屑病皮损的面积及严重程度无明确关联，不能作为反映疾病严重程度的指标。