金华猪与长白猪生长和肌肉发育差异的机理研究

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本试验以断奶后的金华和长白仔猪为试验对象,进行了饲养试验、屠宰试验,从肌肉发育相关激素和基因表达的发育等方面揭示两品种猪生产性能、肉品质、肌肉发育变化的种间差异并初步探讨了其机理,为猪肉品质调控技术的创建以及地方品种和外来品种间的杂交利用提供科学依据。选择年龄相同的金华和长白仔猪各18头(共36头),分别于28日龄断奶后,按照品种分成2组,每组3个重复,每个重复6头(公母各半)。金华与长白猪在相同的条件下饲养,自由采食、自由饮水。预试期7天,正试90天。在每个屠宰日龄(35,80和125日龄),分别从各组的每个重复中选取体重相近的试验猪2头(公母各半),每个品种6头,共12头。按常规方法进行屠宰,测定胴体组成。并采集血清、肌肉组织样品进行相关指标分析。根据Genebank登录的猪肌肉组织中MSTN、MyOD、MyoG、MyHC I、2a、2b、2x和内参P-actin基因序列设计引物,分别以肌肉组织mRNA为模板,经过反转录和PCR反应,克隆得到了相应的MSTN、MyOD、MyoG、MyHC I、2a、2b、2x和内参β-actin的基因片段。对测序结果进行序列分析表明,得到的MSTN、MyOD、MyoG、MyHC I、2a、2b、2x和内参β-actin基因序列与Genebank登录的相应基因片段同源性均达到了98%以上。在此基础上,进一步探讨了PCR反应中适宜的退火温度、Mg2+浓度和循环数,构建了适合相应基因序列的优化半定量RT-PCR法,以用于研究金华猪与长白猪肌肉发育相关基因mRNA表达变化及种间差异。屠宰试验结果表明:金华与长白猪胴组成和肉品质参数的发育性变化模式基本相同,金华猪肌内脂肪含量在125日龄时比长白猪高31.25%(P<0.05),大理石纹评分在35:80和125日龄时分别比长白猪高50.48%(P<0.05),50.00%(P<0.05)和28.92%(P<0.05),肉色评分值在125日龄时比长白猪高22.87%(P<0.05)。而金华猪胴体瘦肉率在35,80和125日龄时分别比长白猪低35.99%(P<0.01),25.25%(P<0.01)和29.94(P<0.01),眼肌面积分别比长白猪低20.73%(P<0.05),50.98%(P<0.001)和50.20%(P<0.001),滴水损失分别比长白猪低34.43%(P<0.05),34.00%(P<0.05)和33.08%(P<0.05)。血清指标分析结果示:金华与长白猪血清IGF-I、胰岛素、T3和T4、浓度发育模式一致,血清IGF-I、胰岛素浓度随日龄的增加而显著升高(P<0.05),而血清T3和T4水平则随日龄的增加而显著降低(P<0.05)。金华猪血清胰岛素水平在35、80和125日龄时分别比长白猪高41.04%(P<0.05),53.04%(P<0.01)和63.28%(P<0.01)。血清IGF-I水平分别比长白猪低38.13%(P<0.01),37.58%(P<0.01)和19.77%(P<0.05),血清T4水平比长白猪低30.77%(P<0.01),血清生长激素的基础水平、平均水平和峰强度值分别比长白猪低26.67%(P<0.05),20.00%(P<0.05)和18.81%(P<0.05)。肌肉样品分析结果表明:金华与长白猪肌肉组织中MyoD和MyoGmRNA丰度发育模式基本一致(P<0.05),金华猪MyoD mRNA丰度值在35、80和125日龄时分别比长白猪低288%(P<0.01),44.44%(P<0.05),27.27%(P<0.05)。金华猪MyoD mRNA水平与其胴体瘦肉率之间存在显著的正相关关系,相关系数为0.783(P<0.05),而长白猪MyoD mRNA水平与其胴体瘦肉率之间却存在显著的负相关关系,相关系数-0.888(P<0.05)。在35日龄时,金华猪背最长肌中MyoG基因的表达量比长白猪低77.78%(P<0.05)。两品种猪肌肉中MyHCⅠ、2a、2b、2x的发育模式一致,在35、80和125日龄时金华猪肌肉组织中MyHC I mRNA丰度分别比长白猪高15.01%(P<0.05)、15.85%(P<0.05)和19.82%(P<0.05)。MyHC 2a mRNA丰度分别比长白猪高7.76%(P<0.05)、22.10%(P<0.05)和58.36%(P<0.05)。MyHC 2b mRNA丰度分别比长白猪低23.47%(P<0.05)、9.12%(P<0.05)和12.65%(P<0.05)。结论:1.金华猪与长白猪生产性能和肉品质具有基本一致的发育规律,与长白猪相比,金华猪有较代的生产性能和较优良的肉品质特征。2.金华猪与长白猪生长和肌肉发育相关激素的发育模式基本一致,与长白猪相比金华猪有较高的胰岛素水平,而有较低的GH、IGF-Ⅰ和T4水平。3.金华猪与长白猪肌肉发育相关基因表达规律基本一致,与长白猪相比金华猪具有较低的MSTN、MyoD和MyoG mRNA丰度。4.金华猪与长白猪肌纤维发育相关基因表达规律基本相似,与长白猪相比金华猪有较高的MyHC I和2b mRNA丰度.而有较低的2x mRNA丰度。
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