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目的:通过补肾健脾活血方干预沉默DKK1基因大鼠,探讨补肾健脾活血方对大鼠Wnt信号通路相关因子LRP6、β-catenin、APC、RUNX2、OPG的影响。方法:1、实验动物:3月龄雌性SD大鼠18只。2、实验分组:将大鼠随机分为A.空白对照组(NC),B.空载腺病毒组(Ad-EV),C.沉默DKK1腺病毒感染组(Ad-shDKK1),每组6只,标为1～6号。3、腺病毒转染:将包装了沉默DKK1基因的大鼠腺病毒采用尾静脉注射方法,每只大鼠注射200ul,病毒滴度为(1010)。NC组(空白对照组)不注射病毒,注射等体积生理盐水;Ad-EV组(空载腺病毒组)注射空载腺病毒;Ad-shDKK1组(沉默DKK1组)注射沉默DKK1腺病毒。4、腺病毒转染1个月后,每组1～3号灌胃补肾健脾活血方,4～6号灌等体积生理盐水,连续灌胃2个月后,处死各组大鼠,检测大鼠股骨骨密度(BMD);采用RT-PCR技术检测沉默DKK1腺病毒转染大鼠后,骨组织中DKK1、LRP6、β-catenin、APC、RUNX2、OPG基因的表达情况;采用Western Blot技术检测DKK1、β-catenin、RUNX2、OPG蛋白的表达情况。结果:1、转染腺病毒1周后,采取各组大鼠血清并用RT-PCR检测DKK1表达量,结果表明除A组(空白对照组)外,B组(空载腺病毒组)、C组(沉默DKK1组)腺病毒转染成功。2、C组(沉默DKK1组)股骨骨密度均高于A组(空白对照组)、B组(空载腺病毒组)(P<0.05);A组(空白对照组)、B组(空载腺病毒组)骨密度差异无统计学意义(P>0.05)。在各组组内,灌胃补肾健脾活血方的大鼠股骨骨密度均高于灌胃生理盐水大鼠(P<0.05)。3、C组(沉默DKK1组)与A组(空白对照组)、B组(空载腺病毒组)相比较,LRP6、β-catenin、RUNX2、OPG mRNA 表达增加,β-catenin、RUNX2、OPG 蛋白的表达增加,APC mRNA表达量降低(P<0.05)。4、在A、B、C各组组内,灌胃补肾健脾活血方与灌胃生理盐水相比较,LRP6、β-catenin、RUNX2、OPG mRNA 表达增加,β-catenin、RUNX2、OPG 蛋白的表达增加,APC mRNA 表达量降低(P<0.05)。结论:1、沉默DKK1基因可以提高大鼠骨密度。2、沉默DKK1基因,可以提高LRP6、β-catenin、RUNX2、OPG mRNA表达量,提高β-catenin、RUNX2、OPG蛋白的表达量,降低APC mRNA表达量。3、补肾健脾活血方干预后,可以提高LRP6、β-catenin、RUNX2、OPG mRNA表达量,提高β-catenin、RUNX2、OPG蛋白的表达量,降低DKK1、APC mRNA表达量,降低DKK1蛋白表达量。