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[目的] TPM1是调节细胞骨架蛋白的关键基因，研究表明TPM1在多种肿瘤中起着重要的抑癌基因作用，但TPM1在胆管癌中的表达尚未无研究，本研究拟通过检测TPM1在胆管癌中的表达，并研究TPM1在胆管癌中表达失调的机制，以揭示包括RAS基因突变引起的异常信号通路RAS/PI3K/AKT、RAS/MEK/ERK，以及表观遗传学机制中DNA甲基化、组蛋白去乙酰化、异常表达的microrna-21均参与了TPM1的表达调控，从而阐明在胆管癌中TPM1调控的分子生物学机制，为胆管癌的分子靶向治疗提供新的方向。[方法]1.收集30例肝内胆管癌标本，免疫组化分析胆管癌组织和癌旁组织中TPM1的表达，并培养肝内胆管癌细胞HuCCT1、肝外胆管癌细胞QBC939、正常胆管上皮细胞HIBEC，western blot、荧光定量PCR检测TPM1在胆管癌细胞中的表达。2.分别用RAS特异性抑制剂manumycin A，及其下游信号通路PI3K/AKT抑制剂LY294002，MEK/ERK抑制剂U0126，DNA甲基化转移酶抑制剂DAC，以及组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA体外干预胆管癌细胞，并构建下调microrna-21的慢病毒载体以下调胆管癌细胞中microrna-21的表达，通过以上各种干预措施处理胆管癌细胞后，western blot、荧光定量PCR检测TPM1在蛋白水平及mRNA水平的表达变化。3.分别用manumycinA、LY294002、U0126、DAC、TSA等干预胆管癌细胞后，CCK-8、流式细胞技术、细胞划痕实验分别检测胆管癌细胞增殖、凋亡、迁移能力的变化。[结果]1.免疫组化结果提示TPM1在30例胆管癌组织中，5例为阴性表达，25例为弱阳性，而在对应的30例癌旁组织中，30例癌旁组织表达均为弱阳性。根据western blot及定量PCR结果分析得出，与正常胆管上皮细胞HIBEC相比,肝内胆管癌细胞HuCCT1中TPM1表达明显降低，而TPM1在肝外胆管癌细胞QBC939中表达上调。2.根据western blot及定量PCR结果得出，在manumycinA、LY294002、U0126、DAC、TSA以及下调microrna-21等干预胆管癌细胞后，TPM1在蛋白水平及mRNA水平表达均有变化。3. manumycin A、LY294002、U0126、DAC、TSA处理胆管癌细胞后，胆管癌细胞增殖能力明显降低，凋亡率明显上升，以及迁移能力明显降低。[结论]本实验证实TPM1在30例胆管癌组织中低表达，而经过统计学分析表明TPM1在胆管癌组织和癌旁组织差异无统计学意义，可能与样本量较少有关。TPM1在HuCCT1中表达明显降低，而在QBC939中表达上调，提示TPM1可能在肝内胆管癌细胞中下调，而在肝外胆管癌细胞中上调。并且证实RAS基因突变，及其引起的异常信号通路RAS/PI3K/AKT、RAS/MEK/ERK，以及表观遗传学机制中DNA甲基化、组蛋白去乙酰化、异常表达的microrna-21均参与了TPM1的表达调控。而manumycinA、LY294002、U0126、DAC、TSA均具有较明显的抗肿瘤作用。