MiRNA-92a可下调TrkA蛋白表达并促进神经母细胞瘤增殖和迁移

来源 :中国人民解放军医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jackie_kara
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目的探讨miRNA-92a是否调控TrkA蛋白的表达并影响神经母细胞瘤的增殖和迁移能力。方法通过RT-qPCR技术检测神经母细胞瘤细胞系BE(2)-M17细胞在转染miRNA-92a mimics或miRNA-92a inhibitor后miRNA-92a和TrkA mRNA的相对表达量,分别以U6和β-actin为内参基因;流式细胞术测TrkA蛋白的表达变化;CCK-8法测细胞的增殖能力的变化;transwell小室实验分析对细胞迁移能力的影响。结果1. RT-qPCR对miRNA-92a进行相对定量分析,结果显示:与阴性对照相比,转染miRNA-92a mimics后miRNA-92a表达显著上调;转染miRNA-92ainhibitor后miRNA-92a表达显著下调。2. CCK-8法测细胞的增殖能力的变化,结果显示:与阴性对照相比,转染miRNA-92a mimics后,细胞增殖能力显著增强;转染miRNA-92a inhibitor后细胞增殖能力显著降低。3. transwell小室实验分析对细胞迁移能力的影响,结果显示:与阴性对照相比,转染miRNA-92a mimics后,细胞迁移能力显著增强;转染miRNA-92a inhibitor后,细胞迁移能力显著降低。4. RT-qPCR对TrkA mRNA进行相对定量分析,结果显示:与阴性对照组相比,转染miRNA-92a mimics后TrkAmRNA水平明显降低;转染miRNA-92a inhibitor后TrkA mRNA水平明显增高。5.通过流式细胞术检测TrkA蛋白,结果显示:与阴性对照相比,转染miRNA-92a mimics后TrkA蛋白表达显著下调;转染miRNA-92ainhibitor后TrkA蛋白表达显著上调。结论1.miRNA-92a可显著下调TrkAmRNA的表达水平;2.miRNA-92a可显著下调TrkA蛋白的表达水平;3.miRNA-92a能显著增强BE(2)-M17细胞的增殖和迁移能力;4.miRNA-92a通过调节TrkA蛋白表达可能是其影响神经母细胞瘤增殖和迁移的途径之一。
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