新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起的一种禽类急性、高度接触性传染病。有研究表明用于禽类的ND疫苗并不能完全阻止该病的发生，造成了严重的经济损失。虽然我们对于造成免疫鸡群发生新城疫流行的根本原因尚不明确，但流行毒株的变异很可能是其中的重要因素之一。本研究的目的就是探讨流行毒和疫苗毒的抗原性差异及其与免疫保护的关系。 NDVF₄₈E₉株属于我国特有基因型Ⅸ型，该型病毒在我国长期流行。La Sota是最为常用的疫苗株之一，有研究发现二者在生物学、血清学和基因方面有一定的差异，因此，这两个毒株是我们研究NDV流行机制的优秀模型。为确定两毒株的具体差异所在，本研究在应用可及性、亲水性和二级结构等5种参数对新城疫我国特有标准强毒株F₄₈E₉株与La Sota疫苗株F蛋白的B细胞抗原表位进行综合预测的基础上，进行了表位的鉴定、筛选和比较研究，同时检测了鸡IL-18成熟肽蛋白作为多肽疫苗佐剂的免疫效果。 将两毒株F基因预测表位，根据位置邻近性合并成4段表位区，将F₄₈E₉和La Sota F基因的8个片段亚克隆并构建到原核表达载体，分别对每个毒株的4个预测区段进行表达。应用建立的Tricine缓冲体系5％-20％线性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳对表达情况进行了分析，结果表明4段多肽的分子量分别是，P1:8.0KD、P2:10.8KD、P5:13.5KD、P6:10.5KD。表达的肽段主要以包涵体形式存在，我们用Ni-NTA成功纯化制备了融合表达的重组多肽片段。应用自制的NDV F₄₈E₉和LaSota特异性抗血清，采用Western Blot对所表达的P1、P2、P5、P6肽段进行了抗原性鉴定。结果显示：F₄₈E₉和La Sota株F蛋白4个表位肽段（P1:1-48aa;P2:55-126aa;P5:377-458aa;P6:469-530aa）均成阳性反应，即都含有B细胞表位。比较发现F₄₈E₉P5（FP5）和La Sota P5（LP5）与anti-F₄₈E₉和anti-La Sota血清反应时存在强弱差异。 为了比较FP5和LP5的免疫原性差异和了解是否具有中和性表位。我们将纯化的FP5和LP5与鸡IL-18成熟肽蛋白以不同组合免疫SPF鸡，采集血清，用ELISA检测不同免疫组的NDV特异性血清抗体效价，结果发现各免疫组均可刺激产生一定效价的NDV特异性抗体，有趣的是FP5与鸡IL-18成熟肽蛋白联合免疫组的抗体水平显著高于LP5与鸡IL-18成熟肽联合免疫组以及FP5、LP5单独免疫组：用NDV F₄₈E₉株攻毒结果显示FP5与鸡IL-18成熟肽蛋白联合免疫具有20％的保护率，而其他各组均未保护。说明两个毒株的P5段均具有较好的免疫原性，但它们之间存在不同的中和表