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研究目的:本实验室在前期已经完成榴莲壳和短柄枹枥的化学成分研究工作,E-1’-guaiacyl-2’-methyl-ethyenedioxy)-1’,2’:7,8-6-methoxycoumarin（propacin）是从榴莲壳中分离出的香豆素类化合物,23-O-galloyl-2α,3β,19α-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid 28-O-β-D-glucopyranoside（Q43）是短柄枹栎中一种乌苏烷型三萜皂苷,为进一步探讨propacin和Q43对炎症的防治作用,本文在细胞分子水平分别考察了propacin和Q43对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）致细胞炎症模型的抗炎活性及其作用机制。研究方法:本论文采用qRT-PCR、ELISA、荧光显微成像和western blot等多种实验技术手段,从炎症因子NO、PGE2、白介素1β（interleukin-1β,IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和促炎症介质诱导型一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）和2型环氧合酶（cyclooxygenase-2,COX-2）的表达,以及MAPK和NF-κB信号通路活化来探讨propacin和Q43的抗炎活性及其作用机制。研究结果:propacin对LPS诱导的RAW264.7细胞一氧化氮（nitric oxide,NO）和前列腺素E2（prostaglandin E2,PGE2）释放有显著抑制作用,且剂量范围内无细胞毒性。结合qRT-PCR和Western blot实验结果,propacin在mRNA和蛋白水平均可降低诱导型一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）和2型环氧合酶（cyclooxygenase-2,COX-2）的表达。propacin可显著抑制白介素1β（interleukin-1β,IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）在mRNA水平的表达,且减少IL-6和TNF-α的释放。Western blot结果表明,propacin可降低细胞核转录因子κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）和κB抑制子（inhibitor ofκB,IκBα）的蛋白磷酸化水平,且抑制NF-κB p65二聚体核转位,propacin可抑制丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）通路蛋白磷酸化水平。Q43在0-40μM剂量范围下对细胞的存活率无影响,且对LPS诱导的BV2细胞释放NO和PGE2有显著抑制作用。Q43显著降低了LPS诱导的BV2细胞i NOS和COX-2在mRNA和蛋白水平的表达,下调了LPS诱导的BV2细胞IL-1β、IL-6及TNF-α在mRNA水平的表达,剂量依赖性降低了BV2细胞IL-6和TNF-α的释放。Western blot结果显示,Q43下调了LPS刺激的NF-κB和IκBα磷酸化水平,抑制NF-κB p65二聚体向细胞核转移,抑制MAPKs蛋白磷酸化水平。结论:通过抑制MAPK和NF-κB通路,propacin能够抑制巨噬细胞异常活化介导的炎症反应,Q43能够抑制小胶质细胞异常活化介导的神经炎症反应。作为防治炎症的候选化合物,propacin和Q43具有进一步研究和开发的价值。