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目的:
研究不同营养盐水平下,新月筒柱藻(Cylindrothecaclosterium)与大型海藻羊栖菜(Sargassumfusiforme)以及两种海洋微藻——牟氏角毛藻(Chaetocerosmuelleri)和湛江叉鞭金藻(Dicrateriazhanjiangensis)之间可能存在的化学他感作用。
方法:
1.新月筒柱藻分别与牟氏角毛藻、湛江叉鞭金藻共培养于f/2、N限制(f/2培养基中不加NaNO3)和P限制(f/2培养基中不加NaH2P04·H20)三种培养条件下,以三种微藻单独培养作对照,观察各藻种的生长情况;
2.F/2、N限制和P限制条件下的新月筒柱藻培养水,对牟氏角毛藻和湛江叉鞭金藻进行一次性培养和半连续培养实验,观察其生长情况;
3.新月筒柱藻细胞内含物对牟氏角毛藻和江叉鞭金藻生长的影响;
4.取处于对数生长期的新月筒柱藻与羊栖菜分别在f/2、N限制、P限制培养基共培养,以新月筒柱藻单独培养为对照,分别进行一次性培养和半连续培养,观察新月筒柱藻生长情况;
5.在f/2、N限制和P限制三种培养基中,利用羊栖菜的培养水分别开展牟氏角毛藻和湛江叉鞭金藻的一次性培养和半连续培养,以新月筒柱藻单独培养作对照,观察新月筒柱藻生长情况;
6.羊栖菜干粉末和羊栖菜甲醇、乙醇、丙酮和乙醚提取物,分别设不同浓度梯度接入新月筒柱藻培养,以新月筒柱藻单独培养作对照,观察新月筒柱藻生长情况:
7.利用羊栖菜乙醇提取物进行短期毒性试验,观察24h内新月筒柱藻细胞形态的变化。
结果:
1.在f/2、N限制和P限制培养条件下,新月筒柱藻与两种微藻共培养,不论一次性培养还是半连续培养,牟氏角毛藻和湛江叉鞭金藻生长受到显著抑制(P<0.05),抑制率78%-100%,而新月筒柱藻的生长几乎没受到影响:
2.不同营养条件下的新月筒柱藻培养水,不论一次性培养或半连续培养,对牟氏角毛藻和湛江叉鞭金藻都有抑制作用。其中,在P限制半连续作用下,牟氏角毛藻的生长受到抑制作用最显著(P<0.05),抑制率为56.3%;湛江叉鞭金藻的生长受到抑制作用最显著(P<0.05),抑制率为83.9%;
3.新月筒柱藻细胞内容物对湛江叉鞭金藻的生长表现为显著的促进作用(P<0.05),且浓度越高,促进作用越明显,表现出一定的剂量效应;
4.f/2和N限制条件下羊栖菜对新月筒柱藻表现出显著的抑制作用(P<0.05),而P限制条件下则表现为显著的促进作用(P<0.05)。其中,在N限制一次性作用条件下,抑制率达85%;
5.羊栖菜培养水对新月筒柱藻的生长有不同程度的影响。f/2和N限制培养水表现为显著的抑制作用(P<0.05),P限制培养水刚好相反,表现为显著的促进作用(P<0.05);
6.新月筒柱藻在羊栖菜干粉末浓度1.6g/L,甲醇、乙醇提取物0.8g/L,丙酮提取物3.2g/L和乙醚6.4g/L的作用下,新月筒柱藻在2-3d内全部死亡。
7.羊栖菜乙醇提取物作用下6h后,胞核破裂,核质分散;随着作用时间延长,核质继续碎裂并逐渐向两端分散;至24h时,核质碎裂为细小的碎块,细胞萎缩,细胞膜亦逐渐模糊,界限不清,细胞逐渐解体。
结论:
1.新月筒柱藻对牟氏角毛藻和湛江叉鞭金藻具有明显的竞争优势,新月筒柱藻可能分泌某些化感物质,抑制两种微藻的生长。
2.羊栖分泌某些化学活性物质,但在不同的营养环境下这些物质又不完全相同。另外,羊栖菜藻体内可能存在某些化感物质。