【摘 要】
：
【目的】干扰素-γ(hIFN-γ)是重要的肿瘤免疫相关细胞因子之一,不仅能抑制肝癌细胞增殖、调节其分化、抑制肝癌细胞侵袭及转移,而且还能与其它免疫细胞和细胞因子在分子和基
论文部分内容阅读
【目的】干扰素-γ(hIFN-γ)是重要的肿瘤免疫相关细胞因子之一,不仅能抑制肝癌细胞增殖、调节其分化、抑制肝癌细胞侵袭及转移,而且还能与其它免疫细胞和细胞因子在分子和基因水平有复杂的相互作用,从而增强机体的抗肝癌免疫。本研究构建了含人IFN-γ基因的重组质粒载体pcDNA4/HisMax-hIFN-γ,探讨阳离子脂质体(Cationic liposome)介导的hIFN-γ基因转染对肝细胞癌的抑制作用。【方法】依据GenBank中人IFN-γmRNA序列完整读码框架设计引物,上游和下游引物分别起始密码子的上游和终止密码子的下游插入BamHI、EcoRI的酶切位点,RT-PCR一步法从健康人外周血中扩增人IFN-γ基因,克隆到真核质粒表达载体pcDNA4His/MaxC上,进行酶切鉴定和基因测序,构建含目的基因的重组真核表达载体pcDNA4/HisMax-hIFN-γ。体外培养人肝癌细胞系HepG2,转染含增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组质粒pcDNA4/HisMax-EGFP,决定最佳转染效率。制备含有IFN-γ基因的超纯重组质粒,脂质体介导转染HepG2,用ELISA法检测IFN-γ基因的表达情况。【结果】hIFN-γ基因的mRNA仅存在于pcDNA4His/Max-hIFN-γ导入的肝癌细胞内,其细胞培养上清液存在高水平的hIFN-γ。【结论】成功构建含hIFN-γ基因的重组真核表达质粒pcDNA4/HisMax-hIFNγ。利用脂质体可有效地将hIFN-γ基因转染人肝癌细胞HepG2,并稳定表达hIFN-γ蛋白。
其他文献
目的 探讨依托咪酯全麻患者肌松监测下气管拔管和传统气管拔管效果的差异。方法 选取2014年1月-2015年1月广东省梅州市人民医院收治的120例行全麻择期手术患者作为研究对象,
2012年3-9月，采用实地调研、填表调查、召开座谈会和查阅资料等方式对开阳县病虫害发生、防治及农药使用情况进行调查，结果表明，目前开阳县发生的病虫害种类有17种，发生危害严重
<正>重楼Paridis rhizoma为百合科植物华重楼Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara或云南重楼Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.的
本论文描述了国内外齿轮加工精度及测量的发展现状,分析了大型齿轮加工精度测量仪器研制的必要性和迫切性。按照新的国家齿轮标准规定,对于单个齿轮必须检验的三个偏差项目,
本文在对有关教师的主体性的研究作了简单回顾的基础上提出，教师和学生共同组成的集体是教学活动中的统一主体，并考虑到近10年来对学生的主体性研究较多，对教师的主体性研究得相
莫里森在她的《秀拉》中成功地运用了后现代主义小说的叙事技巧 ,增强了作品的表现力。从结构和布局来看 ,该小说的各个章节虽然按时间的先后顺序来安排 ,但对人物故事的处理
电子商务物流一体化系统是在ISPSIL模型上发展起来的。以EAN.UCC商品的编码方式和以J2EE/EJB技术为代表的分布式体系结构为电子商务物流一体化系统的开发提供了架构支撑。电
小说一向被认为是时间艺术,与绘画和雕刻所建构的空间艺术不同。文学作品无论是史诗、戏剧或者小说,其情节的发生、发展和终结,其人物的经历或成长,都是一个时间流程,有鲜明
目的 辽宁省抚顺市是我国北方典型的以工业生产燃煤污染为主的城市之一,为了解抚顺市城区大气颗粒物污染现状及对学龄儿童肺功能和城市人口部分疾病死亡率的影响,结合抚顺市
近年来,层状铌酸盐化合物,如Ni-K4Nb6017、Bi2InNbO7等,在光催化分解水制氢方面表现出了优异的催化性能,引起了人们对层状铌酸盐光催化性能的注意。KNb3O8、K4Nb6O17都是具有