论文部分内容阅读
在我国肝细胞癌(Hepatocellular, HCC)的发病率居全球首位,其死亡率居恶性肿瘤死亡的第二位。肝癌的早期发现、早期诊断决定着其临床治疗的效果及患者预后。临床常用的检测手段包括血清AFP检测和各种影像学手段。甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein, AFP)是HCC特异性标志物,80%的患者可出现甲胎蛋白的升高。如果将抗AFP抗体与某些显影剂或(和)抗癌药物相连,可以实现对肝癌的靶向成像和靶向治疗,使得影像诊断和临床治疗的同时进行成为可能。本实验拟通过对小剂量二乙基亚硝胺(DENA)诱导SD大鼠原位肝癌模型的MR分子成像、动态观察和病理学对照,研究靶向AFP的超小型超顺磁性纳米粒子在HCC中的特异性靶向成像和分布规律,本研究主要包括两部分。第一部分：sD大鼠肝癌模型的建立及靶向AFP-USPIO在SD大鼠肝癌中的MR成像表现目的：建立SD大鼠肝癌模型,进行AFP抗体标记USPIO增强扫描,观察大鼠肝癌特异性MRI成像。方法：定期配制浓度为0.1mg/ml的DENA水溶液,予25只雄性SD大鼠自由饮用,喂养14周后改为空白饮用水。16-18周时选取利于实验观察的大鼠肝癌模型20只,完全随机分成2组：实验组10只,对照组10只。所有大鼠先行MRI T2WI平扫,实验组注入AFP-USPIO(靶向组),对照组注入USPIO(非靶向组)2h后行T2WI增强扫描,观察病灶的信号变化情况,测量增强前后病灶、肝脏的信号强度,计算其对比噪声比(CNR)；处死大鼠后,取病灶标本行HE、AFP免疫组化染色和普鲁士蓝染色分析。结果：MRI扫描T2WI示肝内多发大小不等的高、稍高信号及混杂信号结节影,选取直径>3mmm的结节作为实验对象进行观察。病灶境界显示清楚,大部分信号均匀,呈高、稍高信号。实验组、对照组分别注入AFP-USPIO、USPIO后2h增强扫描,在注射AFP-USPIO前后,大鼠肝脏-肿瘤的CNR分别为10.0+2.45和4.73士2.51,差异有统计学意义(P<0.001,t=11.23)：而注射USPIO前后肝脏-肿瘤的CNR分别为9.15+1.24和9.96±1.63,差异无统计学意义(P=0.186,t=-1.43)。病理结果HE染色显示,选取作为MRI观察的病灶均为肝细胞肝癌, AFP免疫组织化学结果显示肝癌细胞胞浆内大量表达AFP。普鲁士蓝铁染色结果显示,实验组肿瘤组织间隙及肿瘤细胞内见较多蓝染颗粒,对照组肿瘤组织内蓝染颗粒则较少。结论：二乙基亚硝胺诱发SD大鼠肝癌的模型建立方便,成瘤率高。增强后AFP-USPIO靶向造影剂在大鼠肝癌组织聚集,降低肿瘤组织的信号,虽然肿瘤肝脏的对比噪声比减低,但有助于肝癌的定性诊断。第二部分：AFP-USPIO在大鼠肝癌组织中的分布变化的实验研究目的：研究抗体标记超顺磁性氧化铁纳米粒(AFP-USPIO)在大鼠肝癌组织中随时间的分布变化情况,为下一步偶联化疗药物的纳米粒子在肿瘤内的分布提供理论支持。方法：建立SD大鼠肝癌模型10只,方法及要求同上。先进行MR T2WI平扫,再分别注入实验组(n=5) AFP-USPIO、对照组(n=5) USPIO后0.5小时、1小时、2小时、6小时、12小时、24小时分别行MR增强扫描,测量各时间点病灶、肝脏组织的信号强度,分别计算各时间点的肝脏-肿瘤的对比噪声比(CNR)及瘤体的信号强度下降百分比(PSIL)。结果：MRI平扫T2WI序列上肿瘤组织呈高、稍高信号,部分信号欠均匀。实验组注射靶向对比剂后0.5-1小时肿瘤组织T2信号强度下降不明显,在2-8小时瘤体信号随着时间延长逐渐减低,瘤体在4h出现一个强化高峰期,并持续性强化,而12-24小时瘤体信号稍呈上升趋势。对照组注射靶向对比剂后各时间点肿瘤组织信号未见减低。实验组和对照组瘤体的信号测定值差异具有统计学意义(F=164.5,P<0.01),实验组和对照组的肝脏的信号测定值差异不具有有统计学意义(F=4.6,P>0.01)。实验组和对照组的肿瘤-肝脏CNR计算值差异具有统计学意义(F=132.7,P<0.01)。结论：通过MR扫描动态观察AFP-USPIO增强后肿瘤的信号变化,推断其在肿瘤组织中的分布变化情况。增强后2h-8h瘤体随着时间推移,呈持续性强化,4-8h纳米粒子在肿瘤组织的聚集达到峰值,12h后逐步退出。