基于ITO的可抛型电极的制备及其在生物分子检测中的应用

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目的本课题以构建基于纳米信号放大的便携式、微型化的纸基分析系统为目标,用于生物信号分子的实时、动态检测。我们构建的微/纳米检测平台在整体细胞水平上对细胞的氧化应激分析以及体外生物大分子氧化应激分析提供动态数据。方法我们选用氧化铟锡导电玻璃(ITO)作为工作电极的基板,利用透明胶带固定电极的检测面积,通过分别修饰多壁碳纳米管(MWNTs)、金纳米颗粒(AuNPs)和氧化石墨烯/金纳米颗粒(AuNC-ERGO)来提高工作电极导电性,使用计时电流法(i-t)、差分脉冲伏安法(DPV)以及循环伏安法(CV)实现对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)、白血病细胞(NB4)和神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)在可抛型ITO电极上电化学研究及测定。提供一种简便有效的方法来量化NADH,有望用于与NADH相关的诊断学和酶学领域;把制作的装置用于检测NB4细胞外H2O2的释放,进一步应用于评估亚硒酸钠诱导细胞凋亡的作用;同时证明该装置可以用于α-硫辛酸(α-LA)保护SH-SY5Y细胞免于盐酸布比卡因的氧化应激损伤的检测。结果证明了MWNTs/ITO电极与纸质分析集成设备可以应用于NADH的灵敏性检测,一次性工作电极达到了显著降低NADH氧化过电压和避免工作电极表面污染的目的。使用AuNPs修饰的ITO作为工作电极的纸基电分析设备,由于AuNPs独特的催化活性,电极表现出良好的性能,如低检测限和宽检测范围等。纸基分析设备提供了一个简单可靠的平台来监测由细胞释放的H2O2的动态信息,并可以进一步应用于有效地评估药物引起的细胞凋亡。使用AuNC-ERGO/ITO作为工作电极的纸基电分析设备提供了一个简单可靠的平台,可用于评价盐酸布比卡因所致的细胞氧化应激损伤中α-硫辛酸(α-LA)的保护作用。结论在本论文的三个实验部分,都利用了即抛型工作电极,工作电极分别修饰了多壁碳纳米管(MWNTs)、金纳米颗粒(AuNPs)或者金纳米颗粒-氧化石墨烯(AuNC-ERGO),将工作电极集合在纸基分析系统中,使用电化学检测方法分别进行了生物活性物质、细胞中生物小分子以及抗癌药物对细胞活性影响的检测。研究结果表明我们设计制作的即抛型纸基分析系统在生物样品检测分析中有潜在的应用前景。
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