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目的：我们的前期实验证实ANP32A在心肌细胞中有表达。敲减ANP32A在心肌细胞中的表达可抑制多柔比星诱导的心肌细胞凋亡。MAPKs在多柔比星诱导的心肌细胞凋亡中起重要作用。我们假设：敲减ANP32A经MAPKs通路抑制多柔比星诱导的凋亡。方法：原代心肌细胞培养并运用肌钙蛋白I（cTnI）对其进行鉴定。实验分组：正常心肌细胞组（CMs组）、多柔比星（DOX）组、空载病毒（NC-LV）组、空载病毒+多柔比星（NC-LV+DOX）组、目的基因病毒（Anp）组、目的基因+多柔比星（Anp+DOX）组。将构建的lentivirus-scrRNAi和lentivirus-ANP32A/GV115-RNAi载体分别转染入NC-LV组、NC-LV+DOX组和Anp组、Anp+DOX组。转染72h后应用免疫荧光法检测其转染心肌细胞的效率，并于DOX组、NC-LV+DOX组和Anp+DOX组加入多柔比星（1μmol/L）作用12h建立心肌细胞凋亡模型，应用AnnexinV-FITC法检测6组心肌细胞凋亡率，以心肌细胞凋亡率作为心肌细胞凋亡的观察指标，观察敲减ANP32A对多柔比星诱导的心肌细胞凋亡的影响。运用Westernblot法检测CMs组、DOX组、Anp组和Anp+DOX组的ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK、P38MAPKs、p-P38MAPKs蛋白表达水平。数据运用SPSS13.0统计软件包进行多组间单因素方差分析和组间t检验。结果：体外原代培养的心肌细胞，呈多边形、梭形等，部分细胞聚集成细胞簇，呈放射状排列的同心圆状，搏动呈同步性，搏动频率多为60-100次/分。对细胞进行cTnI鉴定显示95%以上细胞呈阳性表达，符合心肌细胞特征。转染NC-LV和ANP32A敲减重组慢病毒心肌细胞72h后，荧光显微镜观察分别发现90%和80%以上的心肌细胞表达绿色荧光蛋白。分析AnnexinV-FITC法测定DOX组和CMs组心肌细胞凋亡率[（31.94±1.24）%vs（3.62±0.53）%,（p<0.01）]，提示多柔比星诱导体外培养的心肌细胞凋亡模型成功；分析NC-LV组与CMs组、NC-LV+DOX组与DOX组凋亡率[（4.53±0.61）%vs（3.62±0.53）%,（p>0.05）]、[（33.14±1.57）%vs（31.94±1.24）%,（p>0.05）]，提示慢病毒对心肌细胞的毒性不影响结果分析；分析Anp+DOX组与DOX组凋亡率[（16.62±2.07）%vs（31.94±1.24）%,（p<0.05）]，说明敲减ANP32A能部分抑制多柔比星诱导的心肌细胞凋亡。分析DOX组与CMs组p-ERK1/2/ERK1/2比值未见明显差异，无统计学意义（p>0.05），说明多柔比星未引起ERK1/2活性的变化；DOX组与CMs组p-JNK/JNK比值高了1.5倍，差异有统计学意义（p<0.05），说明多柔比星通过增加JNK的活性诱导心肌细胞凋亡；DOX组与CMs组p-P38/P38MAPKs比值高了0.9倍，差异有统计学意义（p<0.05），说明多柔比星通过增加P38MAPKs的活性诱导心肌细胞凋亡。分析Anp+DOX组与DOX组p-JNK/JNK比值低了1.43倍，差异有统计学意义（p<0.05），说明敲减ANP32A通过下调JNK活性抑制多柔比星诱导的凋亡；Anp+DOX组与DOX组p-P38/P38比值低了0.83倍，差异有统计学意义（p<0.05），说明敲减ANP32A通过下调P38MAPKs活性抑制多柔比星诱导的凋亡。结论：敲减ANP32A可能通过下调JNK、P38MAPKs活性抑制多柔比星诱导的心肌细胞凋亡。