背景：肺癌已成为我国第一大恶性肿瘤，严重威胁着国人健康。在新发病肺癌患者中，非小细胞肺癌（Non-Small Cell Lung Cancer，NSCLC）占到80%以上，且大多数患者确诊时已是晚期，已失去了治疗最佳时机。针对晚期肺癌患者的治疗，仍是以传统的化疗为主，然而传统的化疗药物有效率低，患者耐受性较差，虽然近年化疗药物较前有所发展，但晚期肺癌的5年生存率未见明显提升。伴随着肿瘤分子生物学的研究进展，人们对肿瘤发生、发现过程的深入研究，发现肿瘤细胞内存在某些蛋白和细胞因子的过表达或者多态性表达有关，其中包括热休克蛋白90(Heat ShockProtein90, HSP90)、表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)、人表皮生长因子受体2（Human Epidermal Growth Factor ReceptorType2，HER2）等。研究还发现通过抑制肿瘤细胞这些蛋白或细胞因子的作用，可以诱导肿瘤细胞凋亡，发挥抗肿瘤作用，进而出现了EGFR酪氨酸激酶抑制剂（EGFR Tyrosine Kinase Inhibitors，EGFR-TKI）、HSP90抑制剂等靶向治疗药物。它们中有的已经应用于临床，有的正在进行临床实验，他们都展现出良好的抗肿瘤活性。EGFR-TKI是最早应用于NSCLC治疗的分子靶向药物之一，其中小分子EGFR-TKI已被广泛应用于临床中，如Gefitinib（吉非替尼）、Erlotinib（厄洛替尼）等。EGFR-TKI主要是对EGFR基因突变（外显子18、19、21）NSCLC患者有效，有效率可达80%以上，而对于无EGFR基因突变的患者基本无效，因而EGFR基因突变是EGFR-TKI应用的一个重要依据。随着对NSCLC中EGFR基因突变的深入研究，发现EGFR基因突变主要发生在肺腺癌内，故后续研究主要是针对肺腺癌进行的。世界上不同区域的EGFR基因突变不同，其中亚洲地区、女性非吸烟的肺腺癌中突变率较高。统计显示，我国不同地区、不同民族EGFR基因突变也存在差异。然而随着EGFR-TKI的应用，发现用药患者或早或晚的会出现耐药，继续用药则无治疗效果，进而限制了EGFR-TKI在临床中的应用。因此，寻求EGFR-TKI耐药机制和解决方法成为当今研究热点。HSP90抑制剂是另外一种用于肿瘤治疗的靶向药物，目前HSP90抑制剂已应用于NSCLC治疗的临床实验中，研究发现EGFR-TKI耐药的肺腺癌患者也有治疗效果。在一项HSP90抑制剂治疗EGFR-TKI患者的Ⅱ期临床实验中发现，HSP90抑制剂对EGFR基因突变肺腺癌患者有效率更高。HSP90（Heat Shock Protein90，Hsp90）在正常细胞内含量丰富，它在多种恶性肿瘤中高表达，以HSP90α表达为主，并参与癌细胞的分化、增殖和远处转移等过程。目前，多种HSP90抑制剂已进入临床研究，表现出良好的抗肿瘤活性。HSP90在细胞内是通过结合“客户蛋白”来发挥生物学效应，HSP90抑制剂的抗肿瘤作用机制是通过竞争性结合HSP90的活性位点，导致其“客户蛋白”的降解，阻断肿瘤细胞中多条信号传导通路，从而发挥抗肿瘤作用。已知HSP90的客户蛋白有200多种，其中包括EGFR、HER-2等。EGFR-TKI和HSP90抑制剂对NSCLC都有疗效，他们在肺癌中的作用机制不同，EGFR基因突变时EGFR-TKI用药依据，而HSP90在肺癌中的高表达是HSP90抑制剂作用的基础。EGFR基因突变不但可以增加患者对EGFR-TKI的敏感性，也可增加HSP90抑制剂NSCLC中的的有效率。EGFR基因突变增强HSP90抑制剂的疗效的机制尚不明确，EGFR基因突变与HSP90α表达间是否存在某种联系，目前国内外相关报道还较少。目的：1收集既往行EGFR基因突变检测的肺腺癌患者临床资料，以了解肺腺癌中EGFR基因突变情况与临床特征的关系。2通过检测NSCLC患者中HSP90α表达，探讨肺鳞癌与腺癌中HSP90α表达的差异，并探索NSCLC中HSP90α表达与临床特征的关系；探索肺腺癌中EGFR基因突变患者与非基因突变患者中HSP90α表达情况，以了解肺腺癌中EGFR基因突变和HSP90α表达的关系。方法：本研究选取2009年1月至2013年12月期间，河北医科大学第四医院收治经手术、支气管活检或穿刺病理证实，且未经放、化疗治疗的112例肺腺癌患者和35例鳞癌患者为研究对象。112例肺腺癌中，手术治疗患者71例，非手术治疗患者41例，35例鳞癌患者均经手术治疗。112例肺腺癌患者均经EGFR基因突变检测（河北医科大学第四医院病理科，MEL法，检测位点：外显子18、19、21）。所有患者TNM分期标准参照2009（IASLC/UICC）国际肺癌分期(第七版)。1收集112例肺腺癌患者的病理及临床资料，并进行整理，统计EGFR基因突变情况，分析EGFR基因突变与各临床特征关系。应用SPSS19.0软件对结果进行分析处理，应用χ2检验进行率的比较，α＝0.05水准，P＜0.05有意义。2通过免疫组化S-P法检测106例经手术治疗NSCLC患者中HSP90α表达，分析肺腺癌和肺鳞癌中HSP90α表达率和表达量的差异。分析106例NSCLC患者不同性别、年龄、TNM分期、肿瘤直径、有无淋巴结转移、有无吸烟史组中HSP90α阳性表达率和表达量的差异。免疫组化结果应用半定量法和定量分析法进行分析处理,得出不同组别中HSP90α的阳性表达率和每个患者中HSP90α的表达量，每组表达量用x±s表示。应用SPSS19.0软件进行数据处理，χ2检验进行阳性表达率的比较分析，P＜0.05有意义；非参数秩和检验进行表达量的比较，P＜0.05有意义。结果：1112例肺腺癌中EGFR基因突变情况全部112例肺腺癌患者中，共检出EGFR基因突变60例，突变率为53.6%（60/112）。2112例肺腺癌中EGFR基因突变与临床特征的关系2.1EGFR基因突变与性别的关系男性患者突变率40%（26/65），女性患者突变率72.3%（34/47），男性突变率与女性突变率的对比χ2检验：χ2=11.47,P=0.01,提示性别与EGFR基因突变率具有明显差异，且女性中EGFR基因突变率明显高于男性患者。2.2EGFR基因突变与吸烟的关系非吸烟患者突变率58.7%（54/92），吸烟患者突变率30.0%（6/20），χ2检验显示：χ2=0.012，P<0.05，提示吸烟组与非吸烟组中突变率有明显差异，非吸烟患者EGFR基因突变率明显高于非吸烟者。2.3EGFR基因突变与年龄、TNM分期的关系对不同年龄、TNM分期中的EGFR基因突变率进行χ2检验，P值均大于0.05，显示不同年龄、TNM分期中EGFR基因率无明显差别。3.112例肺腺癌中60例EGFR基因突变患者中各突变位点(外显子18、19、21)与性别的关系（详见Table1）60例EGFR基因突变患者中EGFR外显子18、19、21三种位点突变占总突变比例为8.3%（5/60）、55%（33/60）、36.7%（22/60）。EGFR外显子18、19、21位点突变在男性突变患者中的比例分别是7.7%、57.7%、34.6%，女性患者比例为8.8%、53.0%、38.2%，χ2检验显示EGFR外显子18、19、21突变率在不同性别中无明显差异（P值均大于0.05）详见Table2。4HSP90α在106例NSCLC中的表达HSP90α的阳性表达主要在细胞浆内，在细胞核内表达较少，其阳性染色为棕黄色颗粒状,在细胞内呈弥漫分布，HSP90α在106例NSCLC中高表达，其阳性表达率为84.9%（90/106）。HSP90α在35例肺鳞癌中阳性表达率为88.6%（31/35），在71例腺癌中阳性表达率为83.1%（59/71），阳性表达率χ2检验χ2=0.548,P=0.459提示HSP90α在肺腺癌和肺鳞癌中的阳性表达的率无明显差异。HSP90α在35例肺鳞癌中的表达量为0.0263±0.0091，在71例肺腺癌中表达量为0.0250±0.0133，表达量非参数秩和检验Z=-1.368,P=0.171,P＞0.05，结果提示肺鳞癌和肺腺癌中HSP90α表达量无统计学差异。5NSCLC中HSP90α表达与临床特征的关系5.1NSCLC中HSP90α表达与TNM分期的关系HSP90α在79例I、II期（早期组）患者中和27例III（中晚期组）患者中的阳性表达率分别为79.7%（63/79），100%（27/27），阳性表达率的比较，χ2=4.957，P=0.026，两组中HSP90α阳性表达率有显著差别；HSP90α在两组中的表达量分别为0.0196±0.0066，0.0305±0.0087，非参数秩和检验Z=-5.196,单侧检验P=0.000，HSP90α在表达量在早期组和中晚期组中有明显差异。5.2NSCLC中HSP90α表达与有无淋巴结转移的关系HSP90α在50例淋巴结转移组(N+)和56例无淋巴结结转移(N0)组中阳性表达率分别为94%（47/50）、76.7%（43/56），χ2检验χ2=6.108，P=0.013；HSP90α在淋巴结转移组（N+）和无淋巴结转移组（N0）中表达量分别0.0289±0.0105，0.0208±0.0114。非参数秩和检验Z=-3.590，P=0.000，结果提示淋巴结转移组中N(+)和无淋巴结转移组（N0）中HSP90α的阳性表达率和表达量均有统计学差异。经统计分析HSP90α在不同性别、年龄、肿瘤大小、有无吸烟史等组别中阳性表达率和表达量无明显差别，P均大于0.05（详见Table3、4）。6肺腺癌中EGFR基因突变与HSP90α的表达的关系HSP90α在41例EGFR基因突变组和30例非基因突变组中阳性表达率分别为85.4%（35/41）,83.3%（25/30），两组中HSP90α阳性表达率比较χ2，检验χ2=0.000，P=1.000，提示EGFR基因突变组中HSP90α阳性表达率与非基因突变组无统计学差异。基因突变组与非基因突变组中HSP90α表达量分别为0.0245±0.0121、0.0248±0.0107，两组HSP90α表达量比较应用非参数秩和检验，得出Z=-1.228，单侧检验P=0.110，结果提示EGFR基因突变组和非基因突变组中HSP90α表达量也无明显差异。结论：1本研究中肺腺癌患者EGFR基因突变率达53.6%，女性、非吸烟患者突变率明显高于男性、吸烟患者。吸烟和性别是影响EGFR基因突变的重要因素。而年龄、TNM分期与EGFR基因突变无明显。EGFR基因突变位点主要集中在外显子19和外显子21，以EGFR外显子19为主，不同性别中EGFR外显子18、19、21位点突变率无明显差异。2本研究NSCLC中HSP90α在高表达，HSP90阳性表达率和表达量与TNM分期、淋巴结转移等因素有明显联系，临床病理分期越晚、淋巴结转移越多则HSP90α的阳性表达率和表达量就会越高，而与性别、年龄、吸烟、肿瘤直径等因素无明显联系。3本研究肺腺癌中EGFR基因突变患者与非基因突变患者中HSP90α阳性表达率和表达量无明显差异。