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背景:SET结构域5(SETD5)是蛋白质赖氨酸甲基转移酶家族的不典型的成员。研究表明,SETD5在前列腺癌、胰腺导管癌和乳腺癌中的表达上调。然而,SETD5在胃腺癌中的表达以及通过 Phosphoinositide 3-kinase(PI3K)/serine/threonine kinase(Akt)和Hedgehog(Hh)信号通路调节胃腺癌细胞干性特征的研究尚未见报道。目的:本文旨在探讨SETD5在胃腺癌组织中的表达情况及其临床病理学意义,并进一步研究SETD5通过PI3K/Akt与Hh信号通路调控胃腺癌细胞干性特征的作用,进而为临床靶向治疗提供参考价值。方法:首先采用免疫组织化学法检测SETD5在177例胃腺癌组织标本和20例癌旁正常胃粘膜上皮组织标本中的表达情况,分析SETD5的表达与临床病理参数、肿瘤微环境相关因子、肿瘤干性相关蛋白、细胞周期相关蛋白,以及信号通路相关蛋白的关系;采用Kaplan-Meier生存分析证明SETD5对胃腺癌患者预后的有效价值。其次,用蛋白质印迹法及免疫荧光法检测胃腺癌细胞株MKN74,MKN28,SNU638,AGS中SETD5以及肿瘤干性相关蛋白的表达情况。通过esiRNA转染技术沉默SETD5基因,用球体形成实验检测MKN28细胞的球体形成能力的变化;用PI单染流式细胞术和迁移侵袭实验检测细胞周期及迁移侵袭能力的变化。抑制Akt蛋白的表达后,用蛋白质印迹法检测在MKN28和MKN74细胞中PI3K/Akt信号通路相关蛋白和SETD5的表达情况。抑制GLI1蛋白的表达后,用蛋白质印迹法检测在MKN28和MKN74细胞中Hh信号通路相关蛋白和SETD5的表达情况。结果:1.SETD5主要表达于胃腺癌细胞的细胞核中,SETD5在胃腺癌的表达高于癌旁正常胃粘膜上皮的表达(P<0.05);SETD5的表达与胃腺癌患者的肿瘤分级,淋巴结转移,远处转移,临床分期均正相关(均P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,SETD5表达阳性的胃腺癌患者的总生存率明显低于阴性者(P<0.05);此外,单因素和多因素Cox回归分析显示SETD5在肿瘤细胞中的高表达是胃腺癌患者总生存率的一个独立的预后影响因素;2.SETD5的表达与缺氧诱导因子-lα(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、增加的肿瘤微血管密度(MVD)密切相关(均P<0.05);3.SETD5的表达与肿瘤干性相关蛋白LSD1、Sox9和CD133的表达呈正相关(均P<0.05);SETD5与肿瘤干性相关蛋白在胃腺癌细胞系MKN74,MKN28,SNU638,AGS中表达趋势一致;另外,免疫荧光结果显示,SETD5与.LSD1、Sox9、CD133共同表达于MKN28和MKN74细胞中;4.SETD5基因沉默后下调了 MKN28和MKN74细胞中肿瘤干性相关蛋白LSD1、Sox9、CD133和细胞周期相关蛋白p16的表达(均P<0.05);SETD5基因沉默后抑制了 MKN28细胞球体形成的能力;SETD5基因沉默后抑制了 MKN28和MKN74细胞周期中S期亚群的比例和迁移侵袭能力(均P<0.05);5.SETD5 的表达与PI3K/Akt信号通路相关蛋白pPI3K p85、pAkt-Thr308和pAkt-Ser473的表达呈正相关(均P<0.05);Akt抑制剂Perifosine抑制了 MKN28和 MKN74 细胞中 pAkt-Thr308、pAkt-Ser473 和 SETD5 的表达水平(均P<0.05);6.SETD5的表达与Hh信号通路相关蛋白Smo、GLI1的表达呈正相关(均P<0.05);GLI1抑制剂GANT61降低了 MKN28和MKN74细胞中GLI1和SETD5的表达水平(均P<0.05)。.结论:SETD5可能是潜在的肿瘤干性相关蛋白,是预测胃腺癌患者不良预后的有效指标;PI3K/Akt与Hh信号通路可能对SETD5的调控起着重要的作用。