【摘 要】
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应用PCR方法嗜酸热硫化叶菌(Sulfolobus acidocaldarius)DG6获得麦芽寡糖基海藻糖合酶(maltooligosyltrehalose,MTSase)的基因,将其克隆至原核表达载体pBV220中,在在肠杆菌DH
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应用PCR方法嗜酸热硫化叶菌(Sulfolobus acidocaldarius)DG6获得麦芽寡糖基海藻糖合酶(maltooligosyltrehalose,MTSase)的基因,将其克隆至原核表达载体pBV220中,在在肠杆菌DH5α中获得了表达,酶活为10U/g-wet cell.为了提高表达量,再用PCR方法优化目的基因的5端与3端,使酶活达到了19.8U/g-wet cell,提高近1倍.然后向重组菌株中引入辅助质粒pUBS520,该质粒带有编码大肠杆菌精氨酸稀有密码子AGG、AGA的tRNA的argU基因,但酶活变化不明显.再将目的基因亚克隆到质粒pET21a,pET30a中融合表达,酶活还是无明显改变.
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