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近年来,猪的遗传改良在猪的生长速度、饲料转化率及胴体瘦肉率上已经取得了很大的进步,但伴随着我国养猪集约化、规模化的发展,商品猪的氧化应激时有发生,对猪群的健康、生长及肉质等造成了严重损害。CuZnSOD(Copper Zinc Superoxide Dismutase)是超氧化物歧化酶(SODs)家族的成员之一,是机体防御氧化损伤的重要金属酶,能转移性地清除超氧阴离子自由基,提高机体抗氧化能力,进而改善健康与肉质。为探索通过磁性纳米颗粒介导精子载体法制备转基因猪的可行性,进一步研究CuZnSOD基因对抗氧化性能等肉质特性的影响机理,本研究通过磁性纳米颗粒介导精子载体法制备了转基因猪。本研究应用PCR、qRT-PCR、western blot等技术对F1代和F2代猪进行检测,通过绝对定量PCR对F1代4头转基因阳性猪进行拷贝数鉴定,与此同时,本研究还验证了CuZnSOD对肉质抗氧化性能等肉质性状的影响。主要研究结果如下:1、通过将实验室前期成功构建的重组表达载体先后与磁性纳米颗粒polyMAG和精液共孵育,然后对3头试验大白母猪进行人工授精,3头母猪共产下F1代仔猪43头,其中,阳性猪13头,阳性率为30.23%。F1代转基因猪中,阳性组在肌肉、肝脏、背膘、肺脏及肾脏组织中CuZnSOD基因mRNA表达量均高于阴性组,并且在肌肉和肺脏组织中达到差异显著水平(P<0.05);阳性组在肌肉、肝脏、背膘、肺脏及肾脏组织中CuZnSOD蛋白的表达量都高于阴性组,并且在肌肉组织和肝脏组织中达到差异显著水平(P<0.05)。绝对定量PCR对F1代转基因阳性猪进行拷贝数鉴定,4头阳性猪中外源基因拷贝数分别为:25.89、80.61、106.69、83.03。2、3头F1代转基因阳性母猪共产F2代仔猪44头,其中,阳性猪11头,阴性猪33头,阳性率为25.00%。F2代转基因猪中,阳性组在肌肉、肝脏及背膘组织中CuZnSOD基因mRNA表达量均高于阴性组,并且在肌肉组织和肝脏组织中达到差异显著水平(P<0.05);阳性组肌肉组织中CuZnSOD蛋白的表达量显著高于阴性组(P<0.05)。3、对F1代转基因猪进行抗氧化性等肉质测定,结果表明,转基因阳性猪滴水损失显著性低于阴性猪(P<0.05);阳性组SOD活性始终高于阴性组,并且阳性组SOD1d、SOD2d显著高于阴性组(P<0.05);阳性组MDA含量始终低于阴性组,并且阳性组MDA1d、MDA2d显著低于阴性组(P<0.05)。对F2代转基因猪进行抗氧化性等肉质测定,结果表明,转基因阳性猪滴水损失及烹饪损失显著性小于阴性猪(P<0.05);阳性组SOD活性始终高于阴性组,并且阳性组SOD1d、SOD2d及SOD3d显著高于阴性组(P<0.05);阳性组MDA含量始终低于阴性组,并且阳性组MDA1d、MDA2d显著低于阴性组(P<0.05)。对F2代转基因猪的血清生化指标进行测定,结果表明,阳性组的碱性磷酸酶(ALP)活性显著低于阴性组(P<0.05);阳性组的总蛋白(TP)含量显著低于阴性组(P<0.05)。本研究通过磁性纳米颗粒介导精子载体法成功制备了CuZnSOD转基因猪,且外源基因成功地遗传给了F2代并在F2代体内成功表达。转基因阳性猪的部分肉质性状有所改善,主要表现在阳性猪肌肉具有较高的抗氧化性能及持水能力。