目的:脑卒中是发达国家疾病的第三大致死原因,近几年来缺血性脑血管疾病越来越受关注。脑缺血后细胞死亡有凋亡和坏死两种方式。凋亡,又称为程序性细胞死亡,是主动的可逆的过程,与坏死有不同的形态、生化特征,在缺血再灌注损伤中神经元凋亡扮演了重要角色,所以对凋亡机制的研究具有重要意义。目前,凋亡的详细机制尚未完全清楚。越来越多的证据表明凋亡主要发生在半暗带区域,而缺血中心区快速的能量丢失引起急性坏死,半暗带区被认为是脑缺血的治疗目标。神经元凋亡由类似非神经细胞凋亡的分子信号通路的激活引起。凋亡的重要调节者是两个分子家族:一个是半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶,称为caspases,另一个是bcl-2分子家族,如bcl-2,bax和bid。当bcl-2家族成员引起线粒体膜部释放促凋亡分子,如细胞色素C、凋亡诱导因子从而调节死亡信号,Caspases始动并执行细胞死亡。临床上如何运用凋亡机制有效治疗脑缺血国内外未见报道。本课题拟在成功建立局灶性脑缺血再灌注模型的基础上,观察caspase-3,bcl-2,bax蛋白在大脑皮质的时相表达,神经元凋亡的时相变化,探讨caspase-3,bcl-2,bax蛋白与局灶性脑缺血再灌注(focal cerebral ischemia-reperfusion,FCIR)后神经元凋亡的关系,以及三者之间的关系,为阐明凋亡的机制及脑缺血再灌注损伤的防治提供实验依据。 方法:70只250——300g健康Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组,缺血再灌注组又分为缺血2小时再灌注2小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时组;每组10只动物。线栓法建立局灶性脑缺血再灌注动物模型,根据Longa的线栓法加以改进栓塞左侧大脑中动脉,颈部正中切口