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研究目的在多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）患者和健康对照者中,应用化学发光法/放射免疫分析法和液相色谱-质谱/质谱分析法（Liquid Chromatography-mass spectrometry/mass spectrometry analysis,LC-MS/MS）对静脉血睾酮及其前体物质即总睾酮（Total testosterone,TT）,雄烯二酮（androstenedione,AD）,脱氢表雄酮（Dehydroepiandrosterone,DHEA）和硫酸脱氢表雄酮（Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S）进行测定,评估不同检测方法测定的TT（化学发光法和LC-MS/MS法）,AD（化学发光法和LC-MS/MS法）,DHEA-S（化学发光法和LC-MS/MS法）和DHEA（放射免疫分析法和LC-MS/MS法）数据的差异度和相关性;比较LC-MS/MS法测定的上述物质和游离睾酮指数（Free androgen index,FAI）在表征高雄激素血症中的价值;应用地塞米松抑制试验评价PCOS患者雄激素的优势来源,并评估LC-MS/MS法测定的基线DHEA和DHEA-S对地塞米松抑制试验结果的预测价值。研究方法本研究共纳入102名PCOS患者和41名健康志愿者,PCOS诊断按照鹿特丹标准,健康志愿者既往无内分泌相关疾病病史,月经周期正常,卵巢无多囊样改变,无高雄激素血症的临床表现（包括多毛、痤疮和脱发）,并且既往1年内无怀孕及哺乳史。所有研究对象在月经期的第2-4天、空腹状态到汕大附一院内分泌代谢科门诊,研究者对研究对象进行病史采集、体格检查,获取人口学信息,采集静脉血测定TT,AD,DHEA,DHEA-S,黄体生成素（Luteinizing hormone,LH）,卵泡刺激素（Follicle-stimulating hormone,FSH）和性激素结合球蛋白（sex hormone-binding protein,SHBG）。TT,AD,DHEA,DHEA-S 采用常规检测法（化学发光法/放射免疫分析法）和LC-MS/MS法两种方法检测。在所用试验对象中,应用pearson相关性分析评估化学发光法/放射免疫分析法和LC-MS/MS法检测上述睾酮及其前体物质数据的相关性,并应用ROC分析比较LC-MS/MS法检测的上述睾酮及其前体物质和FAI表征高雄激素血症的价值。随机抽取51名PCOS患者进行2天法地塞米松抑制试验,在基线状态和服用地塞米松后分别测定静脉血皮质醇（Cortisol,CO）,TT,AD,DHEA和DHEA-S,计算TT抑制率,若服用地塞米松后TT值被抑制至基线状态的50%以下,则认为PCOS患者雄激素的优势来源为肾上腺,否则则认为优势来源为卵巢。研究结果第一部分:所有研究对象的临床基本特征本研究纳入102例PCOS患者和41例健康志愿者,PCOS患者TT（0.50±0.23 vs.0.27±0.12,P＜0.001）、AD（1.94±0.75 vs.1.15±0.37,P＜0.001）、DHEA-S（2948.79±1059.11 vs.2340.28±951.74,P＜0.001）、LH（10.64±6.17 vs.4.23±1.81,P＜0.001）、FSH（6.82±2.01 vs.6.09±1.52,P=0.039）、FAI（6.49±4.63 vs.1.57±0.85,P＜0.001）和 BMI（24.32±4.52 vs.20.30±1.77,P＜0.001）均显著高于健康对照组;SHBG 显著低于健康对照组（35.61±22.33 vs.66.70±26.35,P＜0.001）。两组人群年龄（29.02±3.75 vs.29.39±4.23,P=0.628）和 DHEA（10.52±6.42 vs.10.05±5.10,P=0.68）均无统计学意义的差异。第二部分:不同方法测定的睾酮和前体物质数据的差异性和相关性1.在PCOS组和健康对照组患者中,采用常规检测法和LC-MS/MS法测定的TT（TT化学发光=0.645±0.336 vs.TTLC-MS/MS=0.429±0.230,p＜0.01）,AD（AD化学发光=4.219±1.836 vs.ADLC-MS/MS=1.706±0.757,p＜0.01）,DHEA（DHEA 放射免疫=7.509±3.914 vs.DHEALC-MS/MS=10.344±6.038,p=0.003）和 DHEA-S（DHEA-S化学发光=319.563±112.315 vs.DHEA-SLC-MS/MS=277.334±106.955,p＜0.01）数据范围和差异度差别均较大。2.在所有研究对象中常规检测法和LC-MS/MS法测定的睾酮及其前体物质数据均呈一定相关性,其中相关系数最高的是DHEA-S（r=0.827,n=140,P＜0.01）,其次为 AD（r=0.787,n=137,P＜0.01）和 TT（r=0.579,n=141,P＜0.01）,DHEA（r=0.252,n=137,P=0.003）相关性最低。第三部分:睾酮及其前体物表征高雄激素血症的价值1.睾酮及其前体物的相关性分析:在所有试验对象中,LC-MS/MS法测定的TT、AD、DHEA、DHEA-S彼此之间均呈正相关关系（P＜0.05）。2.TT的独立影响因素分析:在PCOS组,TT的独立影响因素是SHBG（β=0.311,P＜0.001）、AD（β=0.834,P＜0.001）和 BMI（β=0.161,P=0.024）;在健康对照组,TT的独立影响因素是SHBG（β=0.256,P=0.005）和 AD（β=0.868,P＜0.001）。3.比较睾酮及其前体物表征高雄激素血症的价值:以PCOS组患者为阳性人群（n=102）,以健康对照组志愿者为参照人群（n=41）,采用ROC分析分别对LC-MS/MS法测定的TT,AD,DHEA,DHEA-S和FAI在表征高雄激素血症中的筛查价值进行评价。（1）TT、AD、FAI、DHEA和DHEA-S五个指标ROC分析的曲线下面积（area under the curve,AUC）分别为 0.816（95%CI:0.742-0.876,P＜0.001）、0.842（95%CI:0.771-0.898,P＜0.001）、0.937（95%CI:0.883-0.971,P＜0.001）、0.506（95%CI:0.397-0.614,P=0.913）和 0.678（95%CI:0.594-0.754,P＜0.001）。AUCFAI 显著高于 AUCTT（0.937 vs.0.816,P＜0.001）和 AUCAD（0.937 vs.0.842,P＜0.001）。AUCTT（0.816 vs.0.678,P＜0.01）和 AUCAD（0.842 vs.0.678,P＜0.001）均显著高于 AUCDHEA-S。AUCTT 和AUCAD 无统计学意义的差异（0.816 vs.0.842,P＞0.05）。（2）根据约登指数确定上述指标作为表征高雄激素血症的最佳切点,TT的切点为0.337ng/ml,敏感性和特异性分别为72.0%（95%CI:62.1-80.5%）和82.93%（95%CI:67.9-92.8%）。AD 的切点为1.309 ng/ml,敏感性和特异性分别为81.0%（95%CI:71.9-88.2%）和73.17%（95%CI:57.1-85.5%）。FAI 的切点为2.50,敏感性和特异性为87.0%（95%CI:78.8-92.9%）和92.68%（95%CI:80.1-98.4%）。DHEA-S 的切点为 1887.057ng/ml,敏感性和特异性分别为86.0%（95%CI:77.6-92.1%）和48.78%（95%CI:32.9-64.9%）。（3）以TT或AD任一指标高于其各自最佳切点表征高雄激素血症,敏感性和特异性分别为83.33%和70.73%。以TT和AD同时高于各自最佳切点表征高雄激素血症,敏感性和特异性分别为70.59%和80.49%。以FAI或AD任一指标高于其各自最佳切点表征高雄激素血症,敏感性和特异性分别为91.18%和68.29%。以FAI和AD同时高于各自最佳切点表征高雄激素血症,敏感性和特异性分别为73.53%和93.68%。第四部分:应用地塞米松抑制试验评价PCOS患者雄激素的优势来源本研究中有51名PCOS患者进行2天法地塞米松抑制试验,所有患者血清 CO（基线值:354.76±120.69 nmol/1;试验后:9.87±4.32nmol/l）、DHEA（基线值:11.29±7.25ng/ml,试验后:1.87±0.81ng/ml）和 DHEA-S（基线值:3220.39±998.27ng/ml,试验后:871.90±378.72ng/ml）在地塞米松抑制试验后均被明显抑制（服用地塞米松后CO,DHEA,DHEA-S值分别被抑制至各自基线状态的50%以下）。地塞米松抑制试验后,分别有9名和8名PCOS患者出现TT和AD明显抑制（服用地塞米松后TT,AD值分别被抑制至各自基线状态的50%以下）。TT被明显抑制的9名PCOS患者,其雄激素分泌优势腺体为肾上腺。以地塞米松抑制试验后TT被明显抑制的PCOS组患者为阳性人群,其余试验对象为参照人群,采用ROC分析分别对LC-MS/MS法检测的基线DHEA和DHEA-S在预测地塞米松抑制试验结果中的价值进行评价。基线DHEA（AUCDHEA=0.714,95%CI:0.509-0.920,P=0.045）可以预测地塞米松抑制试验的结果,其最佳切点为13.29ng/ml,敏感性和特异性分别为66.67%（95%CI:35.42-87.94%）和 85.71%（95%CI:72.16-93.28%）。而基线 DHEA-S（AUCDHEA-S=0.540,95%CI:0.355-0.725,P=0.711）无预测地塞米松抑制试验结果的价值。结论（1）常规法和LC-MS/MS法测定的DHEA-S相关性最高,DHEA相关性最差;（2）在PCOS患者中,FAI是表征PCOS患者高雄激素血症价值最高的临床指标。通过LC-MS/MS法测定的AD在表征高雄激素血症中的价值与TT相当。LC-MS/MS法检测的AD联合FAI可显著提高高雄激素血症筛选的敏感性。（3）17%的PCOS患者雄激素分泌优势腺体为肾上腺,基线DHEA可作为雄激素优势来源的预测指标。