目的通过建立乙醇体外诱导的L-02肝细胞脂肪肝模型,观察L-02细胞脂肪变情况,探讨不同剂量的乙醇对脂肪变L-02细胞损害程度与解偶联蛋白(UCP2)表达水平的关系,观察枳棋子水提取液的影响,进一步探讨乙醇导致AFLD的分子机制及防治。方法采用MTT法筛选乙醇诱导L-02肝细胞脂肪变性的最佳浓度范围。建立脂肪变模型,选最适合浓度枳棋子提取液进行干预,显微镜观察各组情况,观察油红0染色结果,各组在全自动生化分析仪上测.ALT, AST.试剂盒测甘油三酯(TG)含量.采用半定量RT-PCR法测各组UCP2mRNA表达量结果1.MTT筛选乙醇作用浓度,发现大于5%,存活率<50%大部分细胞漂浮,2.4%时存活率>80%,因此选定0.3%-2.4%浓度为最适浓度。2.在最适合浓度下乙醇作用L-02细胞培养48-72小时,油红0染色可见明显红色脂滴,随着乙醇浓度增加,细胞脂肪变性加重。3.脂肪变模型中ALT, AST, TG均增高,枳棋子处理后有相应降低。4.各浓度脂肪变性模型中UCP2mRNA表达均有下降,经枳棋子水提取液干预后UCP2mRNA表达均有明显升高。结论1。乙醇可致L-02细胞脂肪变性,并随乙醇浓度增加脂肪变性程度加重。2.乙醇可降低L-02细胞UCP2 mRNA的表达, UCP2mRNA的低表达可能与L-02细胞AFLD发生有关。3.枳椇子可以降低乙醇的细胞毒性,降低脂肪变性的程度。枳椇子可使L-02细胞UCP2 mRNA的表达上调,并推测UCP2 mRNA的表达上调是枳椇子减轻酒精诱导脂肪变性的机制之一。