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目的:1.建立一种简单、低廉测定随机尿游离型甲氧基肾上腺素类物质(metanephrines,MNs)的直接电化学检测方法。2.用所建立的方法测定嗜铬细胞瘤患者和对照组随机尿液游离型MNs浓度水平,同时也用高效液相色谱-电化学法(high performance liquid chromatography with electrochemical detection,HPLC-ED)检测所有研究对象血浆游离型MNs,并探讨MNs对嗜铬细胞瘤诊断效能。方法:1.分别采用循环伏安法(cyclic voltammetry,CV)和示差脉冲伏安法(differential pulse voltammetry,DPV)对MNs进行定性和定量分析。电极为丝网印刷碳电极(screen-printed carbon electrode,SPCE):工作电极和对电极由碳浆印制,参比电极为Ag/Ag Cl电极。2.标本采用固相萃取技术对其进行预处理后,加入PBS溶液中混匀,然后取50μL滴加于丝网印刷电极工作区上,并于连接电化学工作站用DPV进行反应信号测定。3.MNs水平与HPLP-ED法测定结果进行相关性分析。4.用建立方法测定对照组(n=63)和嗜铬细胞瘤病人组(n=22)随机尿中游离型MNs水平和HPLC-ED法测定血浆游离型MNs浓度,受试者工作曲线(receiver operating characteristic,ROC)用于评价对嗜铬细胞瘤诊断效能。结果:1.随机尿MNs的线性范围为0.25~12.5 mg/L,回归方程Y=0.916X-0.127,相关系数r=0.994,最低定量限是0.20 mg/L,最低检测限为0.05 mg/L。天内相对标准偏差和天间相对标准偏差分别在5.9%~9.7%和6.8%~9.9%之间。天内回收率为82.0%~101.1%,天间回收率为81.0%~96.5%。2.嗜铬细胞瘤患者组随机尿中游离型MNs水平分别采用建立方法与HPLC-ED法测定结果进行相关性分析,相关性良好(r=0.941,p=0.000)。3.本实验建立的方法检测随机尿游离型MNs和HPLC-ED法检测血浆中游离型MN和NMN浓度,嗜铬细胞瘤患者组较对照组显著增高(P均<0.05),当血浆游离NMN和MN截断值分别为0.540 mg/L和0.128 mg/L,NMN的灵敏度与特异度分别是90.9%、95.2%,曲线下面积是0.975;MN的灵敏度与特异度分别是86.4%、85.7%,曲线下面积是0.916。本实验建立方法检测随机尿游离型MNs浓度截断值取0.404mg/L时,灵敏度与特异度分别是95.5%、92.4%,曲线下面积是0.981。结论:1.免修饰SPCE直接检测随机尿液中游离型MNs成本低廉、速度快。SPCE能进行批量生产,在临床诊断方面具有良好的应用前景。2.随机尿游离型MNs诊断PHEO灵敏度优于血浆游离型NMN和MN。基于随机尿具有取样方便、无创伤等优点,随机尿游离型MNs适用于嗜铬细胞瘤早期诊断和预后评估。