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本文以分月扇舟蛾颗粒体病毒为研究对象,通过电镜观察、室内生物测定、石蜡切片等方法,系统研究了该病毒的超微结构、病毒毒力以及野外防治的效果;最后通过提取病毒的DNA,从基因组中扩增出颗粒体蛋白基因,对其核苷酸序列与蛋白质序列进行分析,预测蛋白质二级结构,为研究该基因在病毒感染中的作用提供依据。 本研究取得以下研究成果: (1)在分月扇舟蛾颗粒体病毒超微结构的试验中,通过扫描电镜和透射电镜观察到,病毒颗粒体形态呈椭圆形或卵圆形,有的呈现不规则形,形态平均大小为428.54×237.96nm;在透射电镜下显示病毒杆、内膜与囊膜构成病毒粒子,病毒粒子平均大小为223.44×58.51nm。 (2)分月扇舟蛾颗粒体病毒的室内生物测定试验结果表明,浓度对数和死亡几率值的回归直线方程为y=1.946+0.558x,LC50为2.97×105PIB·mL-1。1.58×105PIB·mL-1,1.58×106PIB·mL-1、1.58×107PIB·mL-1、1.58×108PIB·mL-1、1.58×109PIB·mL-1的半致死时间(LT50)分别为8.55d,6.89d,5.9d,4.65d,4.08d,随着浓度的增大,LT50逐渐缩短。 (3)通过对取食病毒不同时间的幼虫制作石蜡切片,在显微镜下观察发现,颗粒体病毒可在中肠细胞中形成,细胞核变大,使中肠细胞严重变形,但不侵染马氏管和围食膜。 (4)在颗粒体蛋白基因的研究中,利用PCR技术扩增得到498bp片段,测序后将所得序列与CacGV、PsGVA25-6、CpGVA11-2、AoGVS45、CmGVA11-1、HcGVA5-1的相应区段进行序列比较,其中与杨扇舟蛾颗粒体病毒(CacGV)蛋白基因的相似性最高;对该基因的蛋白质基本性质进行了分析,结果显示存在一个明显的疏水区,没有显著意义的跨膜区,同一氨基酸在使用不同的密码子上存在一定的偏向性;蛋白质的二级结构分析表明该基因分别由α螺旋(38.55%)、β折叠(18.07%)、β转角(10.24%)和无规卷曲(33.13%)组成,其中α螺旋占主要结构。 (5)应用浓度为1.83×107PIB·mL-1颗粒体病毒对分月扇舟蛾幼虫进行野外生物防治,结果表明,未套笼试验10d林间防治效果为49.13%,20d效果达到79.41%,套笼试验10d林间防治效果为48.48%,20d效果达到83.21%,说明颗粒体病毒作为生物杀虫剂对分月扇舟蛾有很好的防治效果。