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荞麦（ Fagopyrum esculentum Moench）为蓼科（ Polygonaceae）荞麦属（ Fagopyrum Gaerth）、双子叶一年生作物。主要分为2种,甜荞麦和苦荞麦。我国为世界荞麦的主要产国之一,北部为甜荞麦生产区,西南部盛产苦荞麦。荞麦以其丰富的营养价值与药用价值受到广泛的重视,其开发利用日益成为研究的热点。国内外研究表明荞麦具有众多的营养成分,其药理作用主要有降血糖、降血脂、降血压、抗氧化、强心、抗炎、解痉、降低血管脆性等。近年研究报道苦荞麦有抗肿瘤作用,但甜荞麦抗肿瘤作用未见报导。荞麦多糖（Buckwheat polysaccharide,BP）是从甜荞麦花叶中提取的成分,前期研究显示其能提高实验动物的免疫功能。研究表明多糖类物质具有抗肿瘤、抗炎、抗凝血、抗衰老、保肝等众多功效,如海藻多糖、黄精多糖、杜仲总多糖等的抗肿瘤功效已经得到证明,甜荞麦多糖抗肿瘤的相关研究未见报道。本实验就甜荞麦多糖对小鼠S180肉瘤的辅助治疗作用进行了实验研究。目的:本课题通过建立S180肉瘤小鼠模型,观察BP对小鼠S180肉瘤的辅助治疗作用,探讨BP辅助治疗肿瘤作用的可能机制。方法:1肿瘤模型的建立与分组给药小鼠实体瘤模型:取腹腔传代6d生长的S180荷瘤小鼠,无菌条件下抽取腹水,用生理盐洗涤2次,计数并调细胞到1×108/ml,以0.2ml/只的用量接种于小鼠右前肢腋部皮下。接种后将小鼠随机分为6组:荞麦多糖高剂量组（BP-H）（400mg/kg）、中剂量组（BP-M,200mg/kg）、低剂量（BP-L）（100mg/kg）,CTX（150ug/ml）阳性对照组、CTX+BP-M （200mg/kg+30mg/kg）组、模型对照组、正常对照组,每组24只。于接种后第二天开始灌胃给药,CTX隔天一次腹腔注射,给药30mg/kg,连续给药14天。小鼠腹水瘤模型:小鼠接种腹腔传代6d的S180细胞,腹腔接种肿瘤细胞量为2×107 /只。2观察指标（1）实体瘤小鼠:动态观察小鼠生存质量,生存时间,肿瘤生长抑制率。计算各组小鼠生存期与35d存活率。（2）腹水瘤小鼠:观察小鼠进食量、精神状态等生存质量指标;记录各组小鼠死亡情况、生存天数,观察各组小鼠生存期与25d存活率。（3）免疫功能检测指标:①胸腺（脾）指数:取胸腺和脾脏称重,计算胸腺（脾）指数。②血常规:实体瘤小鼠给药14d后,小鼠摘眼球放血,检测血白细胞（WBC）、单核细胞%（MON%）、淋巴细胞%（LYM%）,中性粒细胞%（Granulocyte %）、血红蛋白（HGB）。③淋巴细胞转化功能:采用MTT法观察各用药组小鼠脾淋巴细胞增殖情况。（4）体外实验:①台盼蓝染色法动态观察BP对S180肿瘤细胞的促凋亡作用,计算细胞凋亡百分率。②应用流式细胞仪检测体外培养肿瘤细胞周期。③PI活细胞荧光染色法检测细胞凋亡,计算细胞凋亡百分率。结果:1 S180实体瘤小鼠:模型对照组和CTX组小鼠逐渐出现活动减少、饮食量降低、消瘦、毛色暗淡粘连、反应迟钝,并逐渐加重,以CTX组更明显;BP各剂量组小鼠的活动、毛色等精神状况明显好于CTX组和模型对照组,BP高、中、低剂量组对S180肉瘤的生长没有明显的抑制作用;35d存活率观察结果显示:由高到低依次为:CTX+BP-M组（70.83%）、BP-M组（62.50%）、BP-H组（54.17%）、BP-L组（45.83%）、Model组（25.00%）、CTX组（20.34%）。2 S180腹水瘤小鼠:BP各剂量组小鼠外观、活动等一般状态明显好于模型对照组和CTX组;BP可提高S180腹水瘤小鼠生存期与存活率,小鼠25d存活率以CTX+BP-M组最高（66.67%）、BP-M组（58.33%）、BP-H组（50.00%）、Model组（20.83%）、CTX组（17.81%）。3免疫功能检测结果:（1）正常对照组、模型对照组及BP各剂量组间小鼠的胸腺（脾）指数相近,无有明显差异（P>0.05）,但CTX能明显降低小鼠的胸腺（脾）指数（P<0.01）; BP-M能明显抑制CTX所致胸腺（脾）指数的降低,与模型对照组比较（P<0.05）。（2）各组小鼠血常规化验结果显示:模型对照组小鼠白细胞明显降低,粒细胞升高;CTX组血细胞各组均明显降低;高、中低剂量BP可以在不同程度上改善血细胞各组分的含量;中剂量BP能明显改善环磷酰胺所致S180肉瘤小鼠血液中各细胞组分数量的降低。（3）CTX能明显抑制S180肉瘤小鼠脾淋巴细胞的转化,BP各剂量组均能促进S180肉瘤小鼠脾淋巴细胞转化,尤其BP-M与模型对照组比较（P<0.01）。BP-M能明显改善CTX所致淋巴细胞转化的抑制作用（P<0.01）。4体外实验:（1）本实验观察荞麦多糖对体外培养S180腹水瘤细胞的抑制作用,凋亡率统计结果显示,随时间延长,各组肿瘤细胞凋亡率均逐渐升高。BP对S180肉瘤细胞增殖具有抑制作用,以中浓度组最为明显。CTX组和CTX+BP-M组细胞凋亡率明显升高,以CTX组最高;CTX+BP-M组中,中浓度BP可以一定程度上改善CTX导致的肿瘤细胞凋亡率的升高,差异明显。（2）应用流式细胞术检测体外培养S180肉瘤细胞的细胞周期,结果显示:与模型对照组相比,BP各浓度组肿瘤细胞G0/G1期细胞数量均增多,以BP-M组增高最为明显（P<0.01）,表明BP能将肿瘤细胞周期阻止于G0/G1期,抑制肿瘤细胞的分裂增殖。肿瘤细胞被抑制后逐渐启动自身的凋亡机制,逐渐凋亡。从而达到间接杀伤肿瘤细胞的目的。CTX组肿瘤细胞G2/M期细胞含量与模型对照组相比明显增多（P<0.01）,而G0/G1期含量明显少于模型组（P<0.05）,表明此细胞毒性药物抑制肿瘤细胞增殖的作用机制是将肿瘤细胞阻滞于G2/M期。（3）本实验通过PI活细胞荧光染色观察荞麦多糖促进体外培养S180肉瘤细胞凋亡的作用。凋亡率统计结果显示,随时间延长,各组肿瘤细胞凋亡率均逐渐降低。BP对S180肉瘤细胞具有明显的促进凋亡作用,以中浓度组最为明显。CTX组和CTX+BP-M组细胞凋亡率明显升高,以CTX组最高。中浓度BP可以一定程度上改善CTX导致的肿瘤细胞凋亡率的升高,具有明显差异。结论:根据上述结果, BP体内抑瘤作用不明显,但可以延长S180肉瘤小鼠生存期,提高其存活率,改善其生存质量;体外实验BP可直接抑制肿瘤细胞增殖,促进其凋亡。其机制可能是BP增强机体免疫功能,抑制化疗药物导致的机体免疫功能的降低,提高化疗效果。