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目的：检测肝肠-钙黏连蛋白(CDH17)在胃癌组织中的表达,探讨其表达与胃癌临床病理特征之间的关系。方法：选取79例胃癌患者及其肿瘤组织标本作为研究对象,采用免疫组织化学方法检测CDH17蛋白的表达,分析CDH17蛋白的表达与临床病理特征之间的关系。结果：CDH17蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为62.1%,CDH17蛋白的表达水平与胃癌的浸润深度、TNM分期及淋巴结转移密切相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：CDH17蛋白的表达与胃癌的恶性进展密切相关,其有可能成为胃癌临床治疗的新靶点。目的：以CDH17基因为靶标设计lenti-shCDH17序列,构建CDH17基因RNAi慢病毒载体,为其体内外实验研究提供依据。方法：利用RNAi技术,设计合成针对CDH17基因的SiRNA,连接到双酶切的Pfu-gw-006质粒载体上,转化感受态细胞,筛选阳性克隆、扩增后抽提质粒,进行DNA测序鉴定。测序鉴定后进行慢病毒包装。慢病毒包装质粒pGC-LV重组载体,pHelper1.0和pHelper2.0共转染293T细胞,得到病毒颗粒并计算病毒颗粒的滴度。慢病毒感染人胃癌细胞株MKN28,采用Real-time PCR和Western blotting检测基因干扰处理后MKN28细胞中CDH17基因和蛋白表达的变化。结果：成功构建了CDH17-shRNA慢病毒载体质粒,经测序插入序列与设计序列一致。293T细胞包装构建成功重组质粒载体并生产出慢病毒颗粒,慢病毒滴度为6E+8TU/rnl。Real-time PCR及Western blotting检测结果表明转染了含目的基因CDH17的慢病毒载体的MKN28细胞CDH17mRNA及蛋白表达下调,lenti-shCDH17组与MKN28组和lenti-shCDH17-neg组比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。而转染了含无义干扰序列的阴性对照病毒组的细胞CDH17mRNA及蛋白的表达不发生变化,MKN28组和lenti-shCDH17-neg组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：构建的重组慢病毒能有效感染人胃癌细胞株MKN28,并使MKN28细胞中CDH17基因和蛋白的表达明显下调。目的：研究慢病毒介导的RNA干扰沉默CDH17基因对胃癌细胞MKN28在细胞侵袭、迁移、增殖、克隆形成和细胞凋亡方面的影响,探讨CDH17基因对细胞凋亡的影响。方法：实验共分3组：MKN28组细胞不予任何处理；lenti-shCDH17-neg组为转染了含无义干扰序列的阴性对照病毒组,lenti-shCDH17组细胞转染含目的基因CDH17的慢病毒载体。CDH17慢病毒表达载体稳定转染MKN28细胞后,检测人胃癌细胞株MKN28细胞的生物学属性改变。细胞侵袭能力的测定采用Transwell侵袭实验；细胞迁移能力的测定采用Transwell迁移实验和细胞划痕试验；细胞的克隆形成能力采用平板克隆形成试验,细胞增殖能力的测定采用CCK8法。采用Western blotting检测caspase-3表达的变化。结果：lenti-shCDH17组细胞侵袭和转移能力明显下降(P<0.01),而凋亡率较MKN28组和lenti-shCDH17-neg组明显提高(P<0.01)。平板克隆形成试验显示lenti-shCDH17组细胞克隆形成数为117.67±12.50/孔,明显少于MKN28组(416.6±31.53/孔)和lenti-shCDH17-neg组(403.33±28.54/孔)(P<0.01),MKN28组与lenti-shCDH17-neg组之间差异无统计学意义(P>0.05)。lenti-shCDH17组细胞增殖能力明显下降(P<0.01)。下调CDH17的表达能使pro-caspase-3的表达下降,相应的增加caspase-3的表达。结论：下调CDH17的表达能抑制人胃癌细胞株MKN28的生长,促使胃癌细胞发生凋亡。目的：研究慢病毒介导的RNA干扰沉默CDH17基因对胃癌细胞裸鼠成瘤能力的影响,探讨肿瘤组织中CDH17和相关信号通路蛋白表达的变化。方法：将裸鼠分三组分别于皮下种植MKN28组细胞,lenti-shCDH17-neg组细胞和lenti-shCDH17组细胞,观察三组裸鼠皮下成瘤能力的差异,4周后,牺牲裸鼠,测量移植瘤的重量大小并固定切片。免疫荧光染色比较CDH17蛋白表达差异；TUNEL法检测组织内凋亡细胞；免疫组织化学检测相关信号通路蛋白表达的变化。结果：lenti-shCDH17组形成的瘤体平均重量为0.180±0.115g,明显小于MKN28组瘤体(1.708±1.119g)和lenti-shCDH17-neg组瘤体(1.988±0.501g)的重量(P<0.01)。免疫荧光染色显示lenti-shCDH17组瘤体表达CDH17蛋白量明显少于MKN28组和lenti-shCDH17-neg组。TUNEL法检测结果lenti-shCDH17组的凋亡率为(52±3.60)%,MKN28组细胞凋亡率为(11.33±4.04)%,lenti-shCDH17-neg组的细胞凋亡率为(5.67±2.08)%。Ki-67蛋白活性检测lenti-shCDH17组增殖细胞明显减少(P<0.01)。caspase-3活性蛋白的表达在lenti-shCDH17组明显增高(P<0.01),而MKN28组和lenti-shCDH17-neg组caspase-3活性蛋白的表达相对较少。结论：CDH17基因的下调可抑制肿瘤生长并促进肿瘤细胞凋亡。