【摘 要】
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目的研究人脐带血间充质干细胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,h UCB-MSCs)移植对大鼠脑梗死炎性因子表达和调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)数量
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目的研究人脐带血间充质干细胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,h UCB-MSCs)移植对大鼠脑梗死炎性因子表达和调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)数量及神经功能缺损的影响。方法40只健康雄性SD大鼠,随机分成四组,分别是(1)假手术组(n=10)(2)缺血再灌注组(n=10)(3)MSC组(n=10)(4)生理盐水组(n=10)。假手术组大鼠只分离出颈部动脉,其余三组均采用改良Longa线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO)。无菌条件下采集脐带血100ml,体外分离h UCB-MSCs并传代培养,选择第6代培养的干细胞做治疗移植用。内含1ml 1×106个h UCB-MSCs的悬液经尾静脉注射入MSC组,将等量的生理盐水采用同样的方式注射到生理盐水组。分别于缺血前、缺血后30min、缺血再灌注2h、3h、6h测定各组实验动物血清中的白细胞介素-6(interleukin IL-6)、γ干扰素(interferon IFN-γ)、IL-10、转化生长因子β(transforming growth factor TGF-β)水平变化,评价h UCB-MSCs移植调节大鼠脑梗死后炎性反应的效果。于1、3、7、14d对大鼠神经功能进行评分,并检测外周血中Treg细胞表达,评价h UCB-MSCs移植对实验动物的神经保护机制。结果MSC组、缺血再灌注组和生理盐水组缺血后IL-6、IFN-γ水平升高,分别在缺血再灌注2h、缺血后30min达高峰,MSC组显著小于缺血再灌注组和生理盐水组;缺血后IL-10、TGF-β水平缺血再灌注组和生理盐水组降低,MSC组升高。在缺血再灌注3、7、14d,缺血再灌注组和生理盐水组的神经功能缺损评分显著高于MSC组(P<0.05)。缺血后7、14d缺血再灌注组和生理盐水组Treg细胞表达较假手术组明显升高(P<0.05);MSC组3、7、14d Treg细胞表达明显高于缺血再灌注组和生理盐水组(P<0.05)。结论h UCB-MSCs移植可诱导CD4+CD25+Treg细胞增殖,促炎性因子IL-6、IFN-γ的水平下降,抗炎性因子IL-10、TGF-β的水平升高,减轻免疫炎性反应,促进缺血再灌注大鼠神经功能缺损的恢复,从而减轻大鼠的缺血性脑损伤,具有神经保护作用。
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