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背景和目的：结直肠癌在我国各地区的发病率居高不下。近期研究显示P21WAFI与结直肠癌的发生、侵袭、转移密切相关，同时培美曲塞在多种肿瘤中通过上调P21WAFI产生抗肿瘤作用的研究也先后问世。本研究中培美曲塞不同药物浓度及时间分别作用于人结肠腺癌细胞HT29后，检测P21WAFI表达以及该表达对HT29增殖和凋亡的影响。方法：1、RT-PCR、Western blot检测培美曲塞及5-FU即阳性对照组不同药物浓度及时间分别作用于HT29后P21WAFI的表达情况。筛选出两种药物最佳浓度及作用时间。2、通过MTT比色法，流式细胞技术比较两种药物在最佳浓度及作用时间对HT29细胞生物学活性的影响。结果：1、RT-PCR、Western blot提示培美曲塞及5-FU最佳浓度及作用时间均为1000μmol/L、48h。2、最适条件下培美曲塞（1000μmol/L，作用48h）和5-FU（1000μmol/L，作用48h）组中的P21WAFI在RT-PCR中的结果分别是0.93±0.19、0.85±0.15，P<0.05；在Western blot中的结果分别是1.59±0.13、1.31±0.14，P<0.05。3、MTT比色法中培美曲塞（1000μmol/L，作用48h）及5-FU（1000μmol/L，作用48h）组中的OD值分别为0.14±0.07,、0.21±0.06，P<0.05均明显低于空白对照组0.51±0.11.流式细胞技术检测凋亡，培美曲塞（1000μmol/L，作用48h）的凋亡率是37.03%，5-FU（1000μmol/L，作用48h）的凋亡率是14.02%，P<0.05,均明显高于空白对照组5.03%。结论：1、培美曲塞、5-FU对HT29细胞增殖抑制作用及凋亡促进作用可能与P21WAFI上调有关。2、相同药物浓度及作用时间时，培美曲塞对HT29细胞增殖抑制作用和凋亡促进作用更明显。