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胚胎干细胞(ESC)培养是ESC研究的基础,饲养层的选择是ESC培养的一个重要方面。本实验曾对不同的猕猴饲养层进行研究,显示能够更好的支持猕猴ESC生长的饲养层FGF-2表达量也较高。FGF-2,又名bFGF(碱性成纤维生长因子),是ESC生长所需的重要因子,但其中的分子机制现在并未完全了解。本文一方面对ESC相关研究进展进行了综述,另一方面对以下内容进行了研究:用转基因和RNA干(RNAi)扰的方法建立不同FGF-2的表达量猕猴耳部皮肤细胞(MESF)系五组:过表达FGF-2(f1),过表达的阴性对照组(f2),FGF-2RNA干扰组(f3),RNA干扰的阴性对照组(f4)以及未作任何处理的对照组(f5),这五组MESF的FGF-2表达量相对值为fl:f2:f3: f4: f5=4:2:1:2:2;c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl在f1中表达量上升,在f3中表达量下降;BMP4,TGF-β2在f1中表达量下降,在f3中表达量上升;表明内源FGF-2能够作用于MESF的TGF-β信号通路,引起相关基因表达量的变化。用这些细胞作为饲养层分别培养两种ESC(猕猴ESC.R366.4和兔ESC,RFESC),连续培养了10代,其中在f1上培养的两种ESC增殖速度都比对照组快,并且c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl,OCT-4,Nanog,Sox2表达量均上升,BMP4表达下调;在f3上培养的猕猴ESC增殖较慢,BMP4表达上调,c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl,OCT-4,Nanog,Sox2表达下调;f3上的兔ESC没有变化。表明ESC中的TGF-β信号通路也受到调节。五组猕猴和兔的ESC形成的EB均表达各胚层早期标记基因(marker),但表达量有差异,f1上ESC形成的EB所有marker都低表达。实验结果表明饲养层中的FGF-2含量高低不仅影响自身相关基因的表达,还对ESC的增殖和维持自我更新有一定的作用。