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食用植物油是人们日常膳食营养的重要组成部分,它不仅可以为人体提供热量,还提供着一些人体必须的脂肪酸。但是在经济利益的驱使下,食用植物油掺假现象频发,不仅扰乱了市场秩序、侵犯消费者权益,甚至会危害人们的身体健康。食用植物油种类真实性鉴别技术是打击油品掺假,维护消费者权益和市场秩序,加强政府监管的先进科学技术。现在市场上最多的检测技术还多是以光谱法、质谱法、色谱法和它们相互之间的联用法等为主的物理化学检测方法。近年来,有关利用生物学的方法来检测食用植物油掺假的报道也相继发出。由于生物学方法具有简便、快速、灵敏等特点,也逐渐成为了食用植物油检测技术的研究热点。但在食用植物油检测中,很多基于分子技术手段的生物学检测方法并未很成熟,其中最为关键的原因是在经过深加工的食用植物油中很难提取到足够量的高质量DNA。本研究应用分子生物学的方法,采用新型纳米材料从植物油中提取DNA,根据DNA具有种间差异性以及种内保守性,通过对特异性DNA片段的实时荧光定量PCR测定,进行物种溯源识别及掺假鉴定。主要研究结果如下:(1)精制食用植物油DNA提取所采用的新型纳米颗粒材料是由偶极聚苯乙烯-聚甲基丙烯酸甲酯复合而成的纳米微球颗粒(dipolar polystyrene-polymethyl methacrylate coomplex nanoparticles,DPPS-PMNP),此纳米颗粒具有独特的亲水性、亲油性和对DNA的超高吸附性与解吸附性。(2)DPPS-PMNP颗粒对食用植物油中DNA的提取效率与体系中DPPS-PMNP纳米微球的量和DNA量的比值存在一定关系。研究发现,在两者比值为5:1的时候,回收效率最高,达到76.56%。(3)DPPS-PMNP Kit提取得到的精制食用植物油DNA质量优于其他两种市售试剂盒,而且能够作为实时荧光定量PCR模板用于后续溯源分析实验。(4)以植物物种特异性叶绿体核酮糖-1,5-二磷酸基因rbcL为靶基因,设计了实时荧光定量PCR检测花生、大豆、油菜、棉花四种精制食用植物油物种的特异性引物和探针,扩增效率分别达到 96.9%、82.3%、95.7%和 91.7%。(5)采用DPPS-PMNP从纯食用植物油和各种混合食用植物油中提取到足够量的DNA,通过实时荧光定量PCR进行溯源分析,不仅能检测出混合油中植物物种组成,还可以检测出各物种植物油的混合比例。以上结果表明,应用DPPS-PMNP纳米微球植物油DNA提取和定量PCR检测试剂盒,可以从纯食用植物油及混合植物油中提取到足量和高纯度的DNA,并对食用植物油进行物种溯源鉴定及混合油的定量分析。