论文部分内容阅读
目的观察夹脊电针结合跑台训练对坐骨神经损伤大鼠胫骨微结构、T12-L1节段脊髓、损伤侧坐骨神经和背根神经节中NGF、TrkA表达以及胫骨中NGF mRNA及其蛋白表达的影响,探讨夹脊电针结合跑台训练对大鼠坐骨神经损伤后骨质改善的相关调控机制。方法用随机数字表法将180只SD雄性大鼠分为5组,每组36只:对照组2组（正常对照组和模型对照组）以及干预组3组（跑台组、夹脊电针组、夹脊电针结合跑台组,以下简称结合组）,再将每组大鼠按照治疗后2周、4周和8周的时间点分为每亚组12只的3个亚组。除正常对照组不做任何干预外,其余各组均按照坐骨神经离断再缝合模型进行造模处理。在模型制造完成后,将模型对照组大鼠放入笼中,除给予食物和水,定时更换垫料外,不做其他处理;对夹脊电针组大鼠进行相应节段夹脊电针治疗;跑台组的大鼠进行跑台训练;结合组进行夹脊电针和跑台训练治疗。在各时间点,采用Micro-CT分析大鼠胫骨微结构的变化、RT-PCR和Western blot技术分别检测大鼠胫骨NGF mRNA和蛋白的表达以及免疫组化检测损伤侧坐骨神经、T12-L1背根神经节和脊髓中NGF和TrkA表达。结果1.Micro-CT检测各组大鼠胫骨微结构在治疗后2周、4周和8周,三个干预组大鼠的相对骨体积分数（B V/T V）、骨小梁数量（Tb.N）和骨小梁厚度（Tb.Th）等参数均高于模型对照组,且低于正常对照组（P＜0.0 5）,而骨小梁分离度（Tb.Sp）均低于模型对照组,高于正常对照组（P＜0.0 5）;从治疗时间点上横向对比,胫骨微结构各项参数在8周最佳;夹脊电针结合跑台训练组在各时间点的结果要优于单独的夹脊电针组和跑台组。2.胫骨组织NGF mRNA及蛋白的表达在治疗后2周、4周和8周,除正常对照组外,RT-PCR检测各组大鼠胫骨中NGF mRNA表达呈现先上升,在2周的时间点到达峰值,在4周和8周下降的趋势;在各时间点,结合组NGF mRNA均显著高于正常对照组、模型对照组、夹脊电针组和跑台组（P＜0.0 5）;在各时间点,除正常对照组外,Western blot检测各组大鼠胫骨中NGF蛋白表达也呈现先上升再下降的趋势,在4周出现峰值,随后下降;在治疗后2周和4周,结合组大鼠胫骨中NGF蛋白的表达均显著高于正常对照组、模型对照组（P＜0.05）;在治疗后8周,结合组大鼠胫骨中NGF蛋白的表达高于正常对照组,并显著高于模型对照组以及跑台组和夹脊电针组（P＜0.0 5）。3.各组大鼠NGF表达在治疗后2周、4周和8周,与正常对照组相比,模型对照组节段脊髓、损伤侧坐骨神经和背根神经节中的NGF表达都有所降低,呈现先下降再上升后下降,在4周到达峰值。①节段脊髓:在治疗后2周,结合组NGF表达显著高于模型对照组（P＜0.05）,低于正常对照组;结合组的NGF表达在治疗后4周和8周均显著高于正常对照组、模型对照组以及单独的夹脊电针组和跑台组（P＜0.05）;②坐骨神经:在各时间点,各干预组NGF表达显著高于模型对照组（P＜0.05）;结合组的NGF表达在治疗后2周低于正常对照组,高于跑台组和电针组;在治疗后4周和8周结合组的NGF表达高于正常对照组,以及单独的夹脊电针组和跑台组（P＜0.05）;③背根神经节:在各时间点,结合组NGF表达显著高于正常对照组和模型对照组（P＜0.0 5）;结合组的NGF表达在治疗后4周和8周均显著高于单独的夹脊电针组和跑台组（P＜0.0 5）。4.各组大鼠TrkA表达在治疗后2周、4周和8周,与正常对照组相比,模型对照组节段脊髓、损伤侧坐骨神经和背根神经节中的TrkA表达都有所降低,呈现先下降再上升后下降,在4周到达峰值。①节段脊髓:在治疗后2周,结合组TrkA表达显著高于正常对照组和模型对照组（P＜0.05）;在治疗后4周和8周,结合组的TrkA表达均显著高于正常对照组和模型对照组以及单独的夹脊电针组和跑台组（P＜0.0 5）;②坐骨神经:在各时间点,各干预组TrkA表达显著高于模型对照组（P＜0.05）;在治疗后2周,结合组的损伤侧坐骨神经中TrkA表达高于正常对照组、跑台训练组和夹脊电针组。在治疗后4周和8周,结合组损伤侧坐骨神经中TrkA表达均显著高于正常对照组、夹脊电针组和跑台组（P＜0.05）;③背根神经节:在各时间点,结合组TrkA表达高于正常对照组,并显著高于模型对照组（P＜0.05）;结合组的TrkA表达在治疗后4周和8周均显著高于单独的夹脊电针组和跑台组（P＜0.0 5）。结论1.夹脊电针结合跑台训练能够改善坐骨神经离断损伤后大鼠胫骨微结构,促进节段脊髓、损伤侧坐骨神经和背根神经节中NGF和TrkA蛋白表达以及胫骨中NGF mRNA及蛋白表达,且二者结合的治疗效果更佳。2.夹脊电针结合跑台训练对胫骨微结构的改善可能与上调 NGF mRNA和蛋白的表达以及促进TrkA表达有关。