目的椎间盘退行性疾病是脊柱外科最常见的一类疾病,而软骨终板作为椎间盘的重要组成结构和营养途径,它的退变是造成椎间盘退变的主要原因。软骨终板退变的发生和发展是一个涉及细胞自噬、增殖、凋亡、侵袭和迁移等复杂的生物学过程,虽然Mirco RNA(微RNA)及HMGB1(高迁移率蛋白-B1)都参与了椎间盘退变的进程,但二者之间是否存在明确的关联及之间的相关机制仍不明确。因此我们通过探究mi RNA及HMGB1与软骨终板细胞功能和自噬的关系,为探讨二者之间的作用机制并为软骨终板退变的治疗提供新的思路和理论依据。方法首先选取ATDC5小鼠软骨前体细胞株,采用1%胎牛血清诱导细胞退变后,进行培养及传代,待细胞传代完成,将退变ATDC5细胞分为两部分进行转染,第一部分设立为以下6个组:空白对照组(Mock组),mi RNA-142-3p低表达组(inhibitor组),mi RNA-142-3p低表达对照组(inhibitor-NC组),空白对照+HMGB1抑制剂组(Mock+anti HMGB1组),低表达+HMGB1抑制剂组(inhibitor+anti HMGB1组),低表达对照+HMGB1抑制剂组(inhibitor-NC+anti HMGB1组);第二部分设立为以下6个组:空白对照组(Mock组),mi RNA-142-3p过表达组(mimics组),mi RNA-142-3p过表达对照组(mimics-NC组),空白对照+HMGB1激活剂组(Mock+HMGB1组);过表达+HMGB1激活剂组(mimics+HMGB1组),过表达对照+HMGB1激活剂组(mimics-NC+HMGB1组)。完成两部分细胞转染后,使用CCK-8法检测细胞增殖、划痕法检测细胞迁移、Transwell小室实验检测细胞侵袭、FITC-Anexin-V/PI双染色法、流式细胞仪检测细胞凋亡、RT-PCR及Western blot法进行蛋白质及m RNA(信使RNA)的检测(包括:HMGB1、Beclin-1、P62、Bax、Bcl-2)。结果1、第一部分实验中观察到在退变ATDC5细胞中下调mi RNA-142-3p的表达,其靶基因HMGB1的表达量升高,自噬正向调节因子Beclin-1及其m RNA表达明显升高;自噬负向调节因子P62及其m RNA表达明显下降;促进凋亡因子Bax及其m RNA表达量明显上升,抑制凋亡因子Bcl-2及其m RNA表达量明显下降,同时细胞增殖、迁移及侵袭能力降低,细胞凋亡率增高。使用HMGB1抑制剂后,细胞增殖,迁移及侵袭能力有所恢复,细胞凋亡率下降。2、第二部分实验中观察到在退变ATDC5细胞中上调mi RNA-142-3p的表达,细胞增殖、迁移及侵袭能力有所恢复。加入HMGB1激活剂后,细胞增殖、迁移及侵袭能力明显降低。结论1、mi RNA-142-3p在软骨终板细胞中通过靶向调节HMGB1发挥抑制细胞增殖、迁移和侵袭并促进细胞凋亡的作用。2、软骨终板细胞内mi RNA-142-3p的含量与细胞内自噬水平变化密切相关3、mi RNA-142-3p及HMGB1通过调节软骨终板细胞内自噬水平而对其细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡等细胞功能产生影响。