目的：利用杂交瘤细胞技术制备抗华支睾吸虫成虫抗原单克隆抗体并对其进行功能鉴定，以期能获得敏感性高、特异性强的检测肝吸虫循环抗原的工具，为华支睾吸虫病的诊断标准化和流行病学调查奠定基础。　　 方法：从感染华支睾吸虫的麦穗鱼中分离囊蚴并感染豚鼠，获取华支睾吸虫成虫并制备成虫抗原。以成虫抗原免疫小鼠，经过三轮基础免疫和一次加强免疫后，使免疫小鼠脾细胞具有稳定分泌抗华支睾吸虫抗体的能力。在融合剂PEG的作用下将免疫小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合，获得杂交瘤细胞。在HAT和HT选择培养基的培养条件下，以间接ELISA法对获得的杂交瘤细胞进行克隆化筛选。对稳定分泌抗华支睾吸虫McAb株采用动物体内诱生的方法进行制备。以饱和硫酸铵沉淀法和FPLC法对获得的单抗腹水进行纯化和纯度鉴定。以间接ELISA法对单抗腹水进行效价测定、亚类测定及特异性检测，Dot-blot法检测单抗免疫学活性。用IFAT进行单抗对虫体的识别部位观察，用免疫组化观察单抗与感染小鼠肝脏组织中抗原的结合。　　 结果：经过动物免疫、细胞融合、选择性培养，克隆化筛选后获得1株稳定分泌抗华支睾吸虫成虫抗原的单克隆抗体株，命名为D10，该细胞生长良好，稳定性好，经过连续传代20次，-70℃冰箱保存后复苏仍然具有良好生长状态及稳定分泌抗体的能力；用此株单抗制备小鼠腹水液，纯化后腹水蛋白浓度为2.2mg/ml，抗体效价检测达到1：200000以上，单抗亚类鉴定显示为IgG1类，FPLC法观察见纯化单抗D10的洗脱峰只有一个单一峰，而且对称性好，纯度达到90％以上。SDS-PAGE电泳显示单抗的重链分子量为50KDa，轻链分子量为26KDa。ELISA法检测其与猪囊尾蚴、弓形虫、疟原虫和日本血吸虫抗原无交叉反应。　　 免疫荧光实验观察到单抗D10能与华支睾吸虫虫体的表皮及虫卵结合。免疫组化显示单抗D10可与病变肝脏组织中汇管区及周围间质中的抗原结合。　　 结论：(1)获得稳定分泌抗华支睾吸虫成虫抗原单克隆抗体株1株，命名为D10。(2)单克隆抗体D10具有较好的纯度和免疫学活性，特异性强，为华支睾吸虫病的研究及华支睾吸虫病诊断抗体的研制奠定了基础。(3)单克隆抗体D10能与感染华支睾吸虫小鼠病变肝脏组织发生特异性结合，为进一步探讨华支睾吸虫感染的免疫致病机制提供了新的实验工具。