水稻密穗突变体的基因定位及幼穗特异表达启动子的分离

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水稻(Oryza sativa L.)是全球最重要的粮食作物之一,其高产育种日益受到人们的重视。由于基因组小、生长周期相对较短等特点,水稻是禾本科作物基因组研究的重要模式作物,对其开展遗传学研究具有重要意义。本研究通过图位克隆技术对水稻密穗突变体进行了基因定位,同时分离了水稻幼穗特异表达启动子。全文主要概述如下:1.从粳稻品种中花11组织培养后代中发现了一个密穗突变体(dense panicle,dp1),表现为穗长变短,着粒密度显著增加等特点,对其后代进行遗传分析和表型鉴定,显示出该突变体受一对不完全显性基因控制。利用密穗突变体为母本与籼稻品种龙特甫B杂交构建F2分离群体,将密穗突变体基因定位在第2染色体标记STS98和STS117之间的19kb区间内。通过Rice Genome Annotation (http://rice.plantbiology.msu.edu/index.shtml)预测此区域只有1个基因LOC_Os02g32960,编码一个未知的保守蛋白,未发现与已知穗型发育相关的基因同源,表明DP1为一新基因。对基因功能进一步验证将有助于水稻高产育种研究。2.利用水稻表达数据库筛选了20个可能具有水稻幼穗特异表达特性的基因,分离了它们的启动子,将候选启动子克隆出来连接pCAMBIA1391Z载体并转化到中花11愈伤组织中,在植株成熟后对各个组织进行GUS染色,分析候选启动子的表达模式。结果筛选到了PS01和PS13两个具有幼穗特异表达的启动子。运用GateWay技术将PS01和PS13两个载体的缺失片段连接到pGW载体中,构建启动子系列缺失载体并转化中花11愈伤组织,分析启动子调控元件。
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