玉米PHYB1基因在拟南芥中的功能分析

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zengyuzhuo
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光作为一个重要的环境因子影响植物生长发育的诸多方面,如开花时间、种子萌发、抗逆反应等。植物通过多种光受体感受环境中的光信号,其中以红光与远红光受体——光敏色素研究最为透彻。前人研究表明,将拟南芥phyB的104与361位点的酪氨酸(Y)改造为苯丙氨酸(F)可增强其感光性。玉米中有两个光敏色素基因phytochrome B1(PHYB1)和phytochrome B2(PHYB2)。为了研究玉米光敏色素B1的功能,我们构建了野生型ZmPHYB1WT,ZmPHYB1Y98F(拟南芥Y104F)和ZmPHYB1Y359F(拟南芥Y361F)3种重组质粒,并将这3种重组质粒转入拟南芥功能缺失突变体phyB-9中。对转基因株系进行表型分析,同时,对ZmPHYB1进行功能分析。主要结果如下:1、通过Basta抗性筛选获得多个转基因纯合株系;2、在白光(WL)与红光(Rc)处理条件下,所有转基因株系的下胚轴比功能缺失突变体phyB-9的下胚轴短,且ZmPHYB1Y98F与ZmPHYB1Y359F转基因株系的下胚轴较野生型ZmPHYB1WT的下胚轴短;长日照条件下,转基因株系的叶柄短于功能缺失突变体phyB-9的叶柄;3、3种转基因株系的ZmPHYBs-YFP经红光处理后可以进入细胞核,形成speckles;4、转基因株系开花时间较突变体phyB-9晚;转基因株系的莲座叶数量增多。此外,ZmPHYB1Y98F与ZmPHYB1Y359F转基因株系开花甚至晚于ZmPHYB1WT转基因株系开花;5、ZmPHYB1的3种形式可以与AtPIF1/3/4/5在细胞核中互作;6、避荫反应响应基因ATHB2、IAA29、PIL1及HFR1与生长素响应基因YUC5、YUC8和YUC9的表达水平,与突变体phyB-9比较,在三种转基因植株中均发生改变。综上所述,ZmPHYB1可以恢复功能缺失突变体phyB-9下胚轴伸长、叶柄长度、开花时间等表型,但不能有效恢复叶绿体的合成。Y98F和Y359F氨基酸的替换可以增加ZmphyB1的活性。在分子水平,ZmPHYB1可与拟南芥AtPIFs互作并诱导下游避荫反应响应基因和生长素响应基因的表达。
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