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目的:鼻息肉是耳鼻喉科常见病,其成年人发病率为1%~2%,鼻息肉的发病机理至今没有被完全证实。目前多数学者证实鼻息肉是以嗜酸性粒细胞浸润为基本病理改变的疾病过程。在嗜酸性粒细胞粘附内皮细胞并穿过内皮细胞进入到细胞外间质这个过程中,有许多细胞因子参与。ICAM-1、VCAM-1和整合素α4是在鼻息肉成因中研究较多的几个细胞因子。
ICAM-1是淋巴细胞相关抗原-1(LFA-1)的配体,促进嗜酸性粒细胞在内皮细胞上的粘附。VCAM-1是很迟出现抗原-4(VLA-4)的配体,起介导淋巴细胞和白细胞与内皮细胞的粘附作用。VLA-4(α4β1),它广泛存在于单核细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞及自然杀伤细胞中,介导细胞与内皮下基质结合,是炎症时白细胞向炎症区域移动的重要粘附分子。
本研究采用流式细胞术(FCM)检测了ICAM-1、VCAM-1和整合素α4在鼻息肉中的表达,旨在探讨此三种粘附分子在鼻息肉发生中的作用,以更深入了解粘附分子在鼻息肉成因中的机制,为防治鼻息肉复发的药物治疗提供新的思路。
方法:1、材料:用2003年11月-2004年11月,于河北医科大学附属第四医院耳鼻咽喉-头颈外科及海南省人民医院耳鼻咽喉-头颈外科住院手术治疗的60例鼻息肉患者的鼻息肉标本为实验组及20例鼻中隔偏曲患者的正常中鼻甲粘膜为对照组。组织取材后用蒸馏水冲洗,75%乙醇固定,置4℃冰箱保存,待集齐标本后一次顺序完成应用流式细胞术(FCM)进行ICAM-1、VCAM-1和整合素α4的定量检测。
2、试剂:第一抗体:1:100鼠抗入CD54单克隆抗体(My13)(ZYMED公司产品);1:100鼠抗人CD106单克隆抗体(B-K9)(DIACLONE公司产品);1:100鼠抗人整合素α4单克隆抗体(美国SantaCruz公司产品);第二抗体:1:100羊抗鼠FITC-IgG(JacksonimmunoReseach公司产品)。单细胞悬液制备后,细胞免疫荧光染色后,上机检测。
3、结果判定;ICAM-1、VCAM-1和整合素α4蛋白表达的定量分析:按照Morkve等提出的荧光指数(FI)表示它们的相对含量,公式为:
FI=实验样品的平均荧光强度一对照样品的平均荧光强度/正常组织样品的平均荧光强度
阳性结果的判定:鼻息肉组织的FI值大于正常粘膜的FI值的X+2S为阳性,反之为阴性。
4、统计方法:所有数据结果经access数据库整理,应用美国SAS公司的SAS统计软件6.12TS020forwindows,进行t检验。P<0.05为差异在统计学上有显著性意义。
结果:1、鼻息肉组织中的ICAM-1、VCAM-1和整合素α4的FI分别为1.453±0.223、1.164±0.065、1.135±0.019,明显高于中鼻甲粘膜中的ICAM-1、VCAM-1和整合素α4的FI(1.000±0.094、1.000±0.034、1.000±0.049),有显著差异(P<0.01);2、ICAM-1在慢性鼻窦炎鼻息肉2型1期、2型2期、2型3期、3型中的的FI分别为1.520±0.219、1.399±0.225、1.518±0.230、1.424±0.199,无显著差异(P>0.05);VCAM-1在慢性鼻窦炎鼻息肉2型1期、2型2期、2型3期、3型中的的FI分别为1.211±0.064、1.150±0.068、1.158±0.037、1.185±0.089,无显著差异(P>0.05);整合素α4在慢性鼻窦炎鼻息肉2型1期、2型2期、2型3期、3型中的的FI分别为1.137±0.020、1.134±0.019、1.136±0.019、1.131±0.020,无显著差异(P>0.05)。3、ICAM-1在男性患者和女性患者鼻息肉组织中的FI分别为1.461±0.232、1.433±0.210,无显著差异(P>0.05);VCAM-1在男性患者和女性患者鼻息肉组织中的FI分别为1.162±0.065、1.169±0.067,无显著差异(P>0.05);整合素α4在男性患者和女性患者鼻息肉细织中的FI分别为1.136±0.019、1.133±0.019,无显著差异(P>0.05)。4、ICAM-1在40岁以下(包括40岁)患者及40岁以上患者鼻息肉组织中的FI分别为1.412±0.233、1.481±0.217,无显著差异(P>0.05);VCAM-1在40岁以下(包括40岁)患者及40岁以上患者鼻息肉组织中的FI分别为1.164±0.071、1.165±0.059,无显著差异(P>0.05);整合素α4在40岁以下(包括40岁)患者及40岁以上忠者鼻息肉组织中的FI分别为1.136±0.018、1.133±0.020,无显著差异(P>0.05)。
结论:1、ICAM-1、VCAM-1及整合素α4在鼻息肉中的表达明显高于正常中鼻甲粘膜,三者可能与鼻息肉的发生有关。2、ICAM-1、VCAM-1及整合素α4在慢性鼻窦炎鼻息肉各临床分型分期中无显著差异,也即在初发鼻息肉与复发鼻息肉中无显著差异,三者可能与鼻息肉的发展无关。3、ICAM-1、VCAM-1及整合素α4在不同性别、不同年龄中无显著差异。