Gly/NO3-N对小白菜抗氧化性及多酚代谢的影响

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土壤中游离氨基酸的变化,对蔬菜作物的氮吸收利用和品质形成产生显著影响。为探究甘氨酸对小白菜(Brassica campestirs ssp.chinensis Makino.var.communis Tsen et Lee)生物量和抗氧化性的影响和氮源(Gly/NO3-N)改变对小白菜生物量、抗氧化性及多酚代谢的影响,本文进行了以下研究:优化了抗氧化物质多酚的萃取方法;试验研究了甘氨酸浓度对9个小白菜品种生物量和抗氧化性影响;探究了Gly/NO3-N对小白菜生物量、抗氧化性以及多酚代谢途径的影响。主要结果如下:1.以常规溶剂萃取法为对照,在单因素试验研究甲醇体积分数、提取时间、提取温度和辅助因素(超声波、微波和摇床)对小白菜多酚萃取量影响的基础上,通过正交试验优化了小白菜抗氧化物质多酚的提取方法。结果显示,小白菜的多酚提取的最优条件为甲醇体积分数50%、提取时间30min、提取温度50℃、超声波辅助。优化后多酚萃取量较对照提高了20.96%,较单因素(甲醇浓度50%、温度40℃、时间60min、超声波辅助)提高了6.20%。2.水培条件下,研究了甘氨酸浓度(2.5mM、5mM、10mM,以硝态氮10mM为对照)对小白菜9个品种(‘五月慢’、‘夏王’、‘矮箕青’、‘艳春’、‘华王’、‘中箕青’、‘新夏青5号’、‘长征2号’、‘矮抗苏州青’)生物量和抗氧化性的影响。结果表明,与硝态氮比较,甘氨酸可显著提高小白菜的抗氧化性,但生物量却显著降低。小白菜的抗氧化性存在品种差异,通过聚类分析将9个品种分为三类:第一类为‘华王’,可作为有机栽培备选品种;第二类为‘艳春’、‘矮抗苏州青’和‘长征2号’;第三类为其余品种。第一类为甘氨酸处理后抗氧化性显著提高的品种;第二类其次,第三类最低。3.水培条件下,进一步探究了硝态氮充足供应条件下,在10L水培箱中施加一定量甘氨酸(Gly/NO3-N浓度比为3:1、1:1和1:3,其中硝态氮浓度始终为6mM,甘氨酸浓度为2mM、6mM、18mM。以不添加甘氨酸为对照)对小白菜生物量和抗氧化性的影响。结果显示,与硝态氮对照相比,Gly/NO3-N处理增加小白菜生物量(14.52%-46.08%)的同时,抗氧化物质含量及活性也显著提高。Gly/NO3-N处理下小白菜各抗氧化物质多酚、类黄酮、谷胱甘肽(GSH)和维生素c(Vc)的含量均表现为随着Gly/NO3-N比例增加呈先升高后降低的趋势,Gly/NO3-N(1:1)时含量最高,Gly/NO3-N(3:1)时最低。Gly/NO3-N处理对小白菜多酚(类黄酮,小白菜多酚的主要组分)含量的影响最显著,Gly/NO3-N(1:1)处理下较对照提高了82.25%(107.10%)。4.Gly/NO3-N显著促进了小白菜多酚代谢途径。Gly/NO3-N处理下小白菜体内苯丙氨酸(Phe)含量显著升高,较对照提高33.79%-86.32%。同时,Gly/NO3-N处理时,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸4-羟化酶(C4H)、查尔酮合成酶(CHS)、查尔酮异构酶(CHI)的活性显著提高,二氢类黄酮醇4-还原酶(DFR)活性显著降低,但对4-香豆酰CoA连接酶(4CL)活性影响不显著。相关性分析得,多酚(类黄酮)含量与PAL、C4H、CHS、CHI活性呈正相关,与DFR和4CL活性呈负相关。综上所述,初次探究小白菜多酚萃取方法,发现正交优化前后小白菜多酚萃取量差异显著,优化后萃取量较常规萃取提高了20.96%。施加适量甘氨酸(Gly/NO3-N)可显著提高小白菜生物量,促进小白菜体内以多酚(类黄酮)为主的抗氧化物质大量积累,提高抗氧化能力。研究发现多酚代谢途径的增强则是多酚(类黄酮)大量积累及抗氧化能力显著提高的物质基础。
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