背景:过量的对乙酰氨基酚(Acetaminophen,APAP)能够诱导患者肝细胞坏死,导致患者严重的肝损伤。坏死的肝细胞释放损伤模式分子,激活固有免疫系统,进而加重肝损伤。当前临床有关对乙酰氨基酚诱导肝损伤(APAP-induced liver injury,AILI)的治疗的药物存在副作用,我们需要可替代的新的治疗方法。芬戈莫德(FTY720)是近几年新开发的一种免疫抑制剂,用于治疗多发性硬化病。该药能减少外周循环淋巴细胞数,显著延长实验动物移植器官的生存,同时并不损害对病毒的免疫应答及免疫记忆功能,且毒副作用低。FTY720在鞘氨醇激酶催化下转化为磷酸化的FTY720,然后磷酸化的FTY720与相应的磷酸鞘氨醇受体结合调控下游信号。最近FTY720已经被证明对局部缺血性再灌注肝损伤有保护作用,然而FTY720对AILI的影响以及鞘氨醇激酶在肝损伤中扮演什么角色目前还不清楚。目的:本研究旨在探索鞘氨醇信号在对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的作用及其机制方法:小鼠(C57BL/6,SphK1-/-和SphK2-/-)过夜饥饿,腹腔注射APAP30分钟后,腹腔给药FTY720,分别在6小时和24小时收集小鼠的血清和肝脏组织。化学法检测血清中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的含量。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的蛋白水平。实时定量PCR检测炎症因子和趋化因子的mRNA水平。组化(H&E和TUNEL)分析肝细胞坏死程度和炎症细胞浸润情况。为了进一步探究肝损伤时巨噬细胞和中性粒细胞浸润程度,分离小鼠肝内非实质性肝细胞,流式抗体标记并用流式细胞仪分析。Western Blotting检测小鼠肝原代细胞中高迁移率蛋白超家族1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)的释放水平和JNK的激活,以及凋亡诱导信号 Bax、Bcl-2 和 Caspase9/3 的变化。结果:与APAP处理组相比,APAP和FTY720共处理组中血清AST和ALT的活性显著降低(p<0.001),肝组织坏死面积显著减少(p<0.001)。同样FTY720能够降低血清中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量(p<0.01),也能够减少肝内炎症因子和趋化因子的mRNA转录水平(p<0.05)。此外,FTY720能够显著降低致死剂量APAP诱导小鼠的死亡率(p<0.01)。APAP处理后,小鼠肝内有大量的巨噬细胞和中性粒细胞浸润。然而在治疗组中,小鼠肝内巨噬细胞和中性粒细胞浸润程度显著减轻。肝原代细胞体外实验表明,FTY720能显著抑制APAP诱导肝原代细胞释放HMGB1和JNK以及凋亡诱导信号Bax和Caspase9/3的激活。SphK1敲除小鼠血清转氨酶活性和肝细胞坏死面积在24小时点低于野生型小鼠和SphK2敲除小鼠。结论:我们的数据表明,FTY720能够抑制肝细胞坏死和凋亡,对肝细胞有直接的保护作用;FTY720通过降低肝内巨噬细胞和中性粒细胞的浸润,减轻对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤;SphK1的缺失导致小鼠对APAP肝毒性的敏感性降低,然而SphK2的缺失并不影响小鼠对APAP肝毒性的敏感性。总之,这些发现证实鞘氨醇信号对AILI中发挥着重要的作用。