具有合成血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)能力植物乳杆菌筛选及功能性食品开发

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近年来,益生菌逐渐走进人们的生活,它的发展推动了食品行业的进步。益生菌(Probiotics)作为一种通过适量摄食,宿主的机体健康就能获得有益影响的细菌,它通过定植宿主肠道、生殖系统等相应的微生态系统,由此平衡与改变这些微环境的微生物多样性,从而使宿主机体的免疫力得到增强。益生菌能够耐受胃酸和胆汁盐,产生诸如细菌素等抑菌物质,缓解乳糖不耐症,抑制人体肠道内致病菌的生长繁殖,降低胆固醇等作用,因而认为益生菌对人体有着举足轻重的作用。植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌是人体肠道中重要的益生菌群,它们在人体系统发挥多种保健功能,它们分泌的代谢产物能够粘附人体上皮细胞,产生细菌素、B族维生素等物质,增强人体免疫力,维护肠道菌群的稳定,创造有益于益生菌生长的环境,通过p H的降低限制致病菌的生长,刺激身体的免疫反应等。目前益生菌产品主要以奶制品为主,通过在乳中加入益生菌或者用益生菌发酵乳品。本研究从8株植物乳杆菌和8株枯草芽孢杆菌中筛选出具有合成血管紧张素转化酶抑制剂能力的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum AY01和Bacillus subtilis SP8-5,接着用这两株菌进行两步法发酵脱脂奶粉产品,并通过控制变量优化发酵条件以及对植物乳杆菌AY01发酵产物的分离。本研究根据紫外分光光度法测定8株植物乳杆菌和8株枯草芽孢杆菌随着时间的推移,它们的发酵产物对血管紧张素转化酶的抑制效果,从而筛选出具有最佳效果的植物乳杆菌AY01和枯草芽孢杆菌SP8-5,通过控制变量(接菌量、发酵温度)得出最佳发酵产品的工艺参数:第一步,Bacillus subtilis SP8-5按CFU为5×10~7/m L接菌,30oC,150 rpm培养21 h;第二步,Lactobacillus plantarum AY01按CFU为5×10~7/m L接菌,37oC静置培养72 h。本研究通过牛津杯法测定植物乳杆菌AY01对致病菌(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌)的抑制能力,结果显示具有较强的抑制能力。本研究对植物乳杆菌AY01通过37oC,96 h培养,离心弃沉淀取上清进行化合物的分离,分离过程中通过细胞MTT毒性试验不断对分离产物段进行筛选,以此判定植物乳杆菌AY01代谢产物具有较强的抑制HCT116细胞增殖的效果,高达97%。
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