自体BM-MSCs移植治疗缺血性心脏病时间窗对心功能影响的实验研究

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目的:利用心导管注射明胶海绵栓子,栓塞猪的左前降支(LAD)远端,建立猪缺血性心脏病-心肌梗死模型。研究心梗后不同时间点经冠状动脉自体移植骨髓间充质干细胞对心功能的影响,并初步探讨其机制。方法:经猪髂前上棘抽取骨髓30ml,培养得到骨髓间充质干细胞。30只健康太湖梅山猪建立心梗模型。分为3个实验组(每组5只)分别在心梗后3小时,2周,4周经冠脉自体移植骨髓间充质干细胞,分别简称急性期移植组,2周移植组,4周移植组。每组设立对照组(5只)在各对应时间点经冠脉注射DMEM培养基。分别简称急性期对照组,2周对照组,4周对照组。并在心梗前,移植前及实验终点心梗8周时对每只猪行MRI,心超观察心脏功能各指标的改变。在细胞移植前后不同时间点检测血清VEGF值。实验终点心梗8周时获取猪心,通过免疫组化检测移植细胞在心肌内定植及分化情况,并检测心肌血管密度。结果:心梗后急性期移植组及各对照组心肌切片未发现有移植细胞定植,左室心功能及心梗面积百分比与对照组相比无统计学差异。心梗后2周及4周移植组组内实验组与对照组相比,包括EF、LVEDD、LVESD等在内的各项心功能指标均有改善,心梗4周移植组各项指标改善优于心梗2周移植组(P<0.05)。心梗8周时,心脏MRI示,急性期移植组及各对照组心脏心梗面积占左室面积减小百分比绝对值差异无统计学意义,4周移植组较2周移植组心梗面积心占左室面积减小百分比绝对值大,差异有统计学意义(P<0.05)。梗后2,4周移植组干细胞移植后血清VEGF水平上升明显,而急性期移植组及各对照组血清VEGF水平无明显变化,心梗4周移植组上升幅度较心梗2周移植组高差异有统计学意义(P<0.05)。心梗8周时,急性期移植组及各对照组心肌切片免疫组化未见移植细胞定植及分化,4周,2周移植组心肌切片免疫组化显示有移植细胞定植及分化,4周移植组移植细胞定植及分化较2周移植组优,差异有统计学意义(P<0.05)。心梗8周时,心肌切片免疫组化显示心肌血管密度,急性期移植组及各对照组心肌切片免疫组化心肌血管密度差异无统计学意义,4周移植组心肌切片免疫组化心肌血管密度较2周移植组高,差异有统计学意义(P<0.05)。心肌血管密度各实验组比较有显著性差异,心梗4周移植组心肌血管密度高于心梗3小时及2周移植组(P<0.05)。结论:(1)心肌梗死后不同时间点自体移植骨髓间充质干细胞对心功能影响效果有差异。(2)心梗急性期移植骨髓间充质干细胞对心功能无明显影响,非急性期心梗移植骨髓间充质干细胞能改善心功能。心肌梗死后4周骨髓间充质干细胞移植治疗效果较优,心梗后2周,4周骨髓间充质干细胞移植治疗效果均优于各自对照组。(3)心肌梗死后不同时间点心肌微环境对骨髓间充质干细胞移植后在梗死心肌中的定植、存活及分化有影响。
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