背景:肺动脉高压具有高发病率和高死亡率,对人类的健康造成了严重的威胁,其重要病理基础包括远端肺血管重塑、肺血管收缩和原位血栓的形成。现有的药物主要针对肺血管舒张,但不能改善肺血管重塑,因此新靶点开发尤为重要。微小RNA在肺动脉高压的发生和发展中发挥重要作用,抑制微小RNA-222可以抑制肺动脉平滑肌细胞的增殖,但微小RNA-222在肺动脉高压中的研究甚少。目的:明确抑制微小RNA-222减轻肺动脉高压和肺血管重塑的作用及机制。方法:首先,在动物水平基于微小RNA-222基因敲除大鼠,利用野百合碱构建肺动脉高压模型,通过Powerlab检测右心室收缩压,分离并称量左右心室,明确微小RNA-222在肺动脉高压中的功能。通过α-SMA、PCNA免疫组化染色,明确微小RNA-222在肺血管重塑中的作用。接着,在细胞水平通过血小板源性生长因子（Platelet derived growth factor-bb,PDGF-bb）诱导人肺动脉平滑肌细胞的过度增殖,采用微小RNA-222的模拟物（mimic）和抑制物（inhibitor）干预微小RNA-222的表达,通过Ed U染色检测肺动脉平滑肌细胞的增殖率,荧光定量PCR检测细胞周期调控基因的表达,明确微小RNA-222对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。进一步,通过生物信息学方法预测出微小RNA-222的下游,采用荧光素酶报告基因实验和功能逆转实验检测VGLL4是否作为微小RNA-222的靶基因调控肺动脉平滑肌细胞的增殖效应。最后,通过荧光素酶报告基因实验和荧光定量PCR证明VGLL4通过抑制YAP-TEAD4复合物的形成,抑制下游促增殖相关基因的转录。结果:在大鼠肺动脉高压模型中,敲除微小RNA-222可以降低右心室收缩压和右心室肥厚程度,减少肺血管重塑。在人肺动脉平滑肌细胞中,抑制微小RNA-222可以抑制PDGF-bb诱导的细胞增殖,而过表达微小RNA-222进一步促进细胞的增殖。荧光素酶报告基因实验表明VGLL4是微小RNA-222的靶基因,微小RNA-222在人肺动脉平滑肌细胞负调控VGLL4的表达。功能逆转实验表明,敲减VGLL4能逆转微小RNA-222抑制物对肺动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用。进一步鉴定出VGLL4能够与YAP竞争性结合转录因子TEAD4,并抑制TEAD4介导的下游基因CTGF、CYR61、CDX2的表达。结论:在动物水平敲除微小RNA-222能够抵抗肺动脉高压和肺血管重塑。抑制微小RNA-222抑制人肺动脉平滑肌细胞的增殖,VGLL4作为微小RNA-222的靶基因,介导抑制微小RNA-222对肺动脉平滑肌细胞增殖的抑制效应。抑制微小RNA-222上调VGLL4,后者通过与YAP竞争性结合转录因子TEAD4,从而削弱TEAD4对下游促增殖基因CTGF、CYR61、CDX2的转录调控作用。综上,靶向微小RNA-222/VGLL4轴有望成为防治肺动脉高压和肺血管重塑的新策略。