【摘 要】
:
目的:(1)基于力学信号感受器TRPV4,阐明传统中药牛蒡子提取物在常压下防治软骨细胞退变的机制;(2)分别在转录组学层面和蛋白质组学层面,阐明机械压力对软骨的作用及内在机制;(3)筛选出在多组学层面,机械压力对软骨干预作用中关键基因(蛋白);(4)基于力学信号感受器TRPV4和压力关键基因(蛋白),阐明传统中药牛蒡子提取物在机械压力下防治软骨退变的机制。方法:(1)培养小鼠原代软骨细胞,应用CC
【基金项目】
:
国家自然科学基金委81873328:基于TRPV4/SOX9/RUNX2信号轴探索牛蒡子汤对超负荷诱导早中期KOA干预的机制研究;
论文部分内容阅读
目的:(1)基于力学信号感受器TRPV4,阐明传统中药牛蒡子提取物在常压下防治软骨细胞退变的机制;(2)分别在转录组学层面和蛋白质组学层面,阐明机械压力对软骨的作用及内在机制;(3)筛选出在多组学层面,机械压力对软骨干预作用中关键基因(蛋白);(4)基于力学信号感受器TRPV4和压力关键基因(蛋白),阐明传统中药牛蒡子提取物在机械压力下防治软骨退变的机制。方法:(1)培养小鼠原代软骨细胞,应用CCK-8增殖实验、免疫荧光技术、实时荧光定量PCR和Western Blot等技术,检测沉默和激活机械敏感离子通道TRPV4对软骨细胞的影响,及牛蒡子提取物在沉默和激活TRPV4时防治软骨细胞退变的机制。(2)构建3D软骨水凝胶,进行模拟步行压力加压实验,应用转录组高通量测序、small RNA高通量测序和蛋白质谱检测技术,筛选出在转录组学层面和蛋白组学层面表达显著变化的基因和蛋白,筛选出差异基因和蛋白富集的生物学功能和通路,最终筛选出在多组学层面表达均发生显著变化的基因和蛋白作为压力关键基因(蛋白)。(3)应用免疫荧光技术、实时荧光定量PCR和Western Blot等技术,检测沉默机械敏感离子通道TRPV4对模拟步行压力干预软骨细胞过程的影响,及牛蒡子提取物在沉默TRPV4时防治软骨细胞退变的机制;验证压力关键基因(蛋白),检测牛蒡子提取物在模拟步行压力下对压力关键基因(蛋白)的作用。结果:(1)牛蒡子提取物会通过促进软骨细胞COL2A11、SOX9的表达,抑制软骨细胞COL1的表达,来达到保护软骨细胞的作用;TRPV4抑制剂GSK2193874具有一定的保护软骨细胞的作用,其作用机制与ARG相似;TRPV4激动剂GSK1016790A会促进软骨细胞COL1、RUNX2表达,抑制软骨细胞COL2A11、SOX9表达,有损伤软骨细胞的作用;ARG与TRPV4抑制剂GSK2193874联合应用,可能有更好的软骨细胞保护作用。(2)在转录组学和蛋白质组学层面,模拟步行压力会通过多种途径和方法影响软骨细胞的生物学过程:(1)骨关节炎相关疾病标志物表达增高(ADRB1、ADRB2、ADRB3、CES2、Hba、HBB、FBN1、COL1);(2)关节软骨及基质退化、破坏等(PRG4、FOS、FOSB);(3)关节内环境炎性因子表达增高(CXCL1、CXCL2、CXCL9、FBN1、AQP1);(4)软骨下骨硬化或矿化(ADRB2、ANXA8、IGFBP5、ALPL、FOS);(5)抑制软骨细胞的有丝分裂过程(SEPT1、CCNB1、CCNB2、CCNE2、HIST1、CENPA);(6)不分泌有丝分裂过程所必须的物质(NDC80、MIS18BP1、CENPA、BUB1);(7)促进软骨细胞的肥大分化(CXCL1、AQP1);(8)调控脂肪代谢过程(CES1D、CES1F、CES2G、FABP4)。(3)筛选出通过实验验证了压力关键基因(蛋白):FOS、FOSB、FABP4、PTGS2、ANXA8和PRG4。(4)在模拟步行压力下,牛蒡子提取物和TRPV4抑制剂表现出了对软骨细胞的保护作用,同时对部分压力关键基因(蛋白)具有一定的干预作用。结论:(1)在常压和模拟步行压力下,牛蒡子提取物均具有防治软骨退变的作用;(2)模拟步行压力会诱导软骨细胞趋向于骨关节炎软骨细胞进展。
其他文献
【目的】分析大肠癌患者血管新生蛋白和相关因子的差异表达,研究大肠癌“血瘀证”与肿瘤血管新生的相关性及活血化瘀中药对缺氧下WSB-1、HIPK2蛋白表达和血管新生相关因子的抑制作用。从缺氧介导WSB-1/HIPK2信号开关探寻活血化瘀中药抗大肠癌血管新生的作用机理。【方法】1、通过大肠癌患者的临床资料、术后病理和血流变结果,分析“血瘀证”分布、临床分期和血液流变学指标表达的差异,免疫组化法检测大肠癌
第一部分基于结膜相干光断层扫描技术对健康人和结膜松弛症患者结膜结构的研究目的:探索健康人球结膜上皮层、固有层和全层厚度整体分布规律,建立结膜结构层次数据库;探索结膜松弛症(Conjunctivochalasis,CCh)患者球结膜上皮层、固有层和全层厚度整体分布规律,验证CCh是局部结构的改变还是整体结膜的改变;寻找常见泪液动力学指标以及眼表症状之间的相关性。方法:使用横断面研究方法,采集健康对照
背景:“解毒方”(Jiedufang,JDF)在治疗原发性肝癌方面取得了很好的临床疗效,但关于JDF调节中晚期原发性肝癌患者炎性因子方面的研究较少。部分患者由于胃肠道功能较差等原因,无法应用JDF治疗。JDF组成药物之一石见穿,为凌教授门诊最常用植物抗癌药物,迷迭香酸(Rosmarinic acid,RA)为石见穿中含量较高的多酚类化学成分,并且迷迭香酸具有良好的抗肿瘤效果,但针对肝癌炎性因子方面
目的:据“线粒体功能紊乱—脊髓神经炎症反应”角度,从分子、细胞、动物多个层面,揭示参芪麝蓉丸及其有效成分通过调节线粒体分裂/融合动态变化,干预受压颈髓神经炎症反应,改善脊髓型颈椎病的可能效应机理。方法:1参芪麝蓉丸对颈髓慢性压迫大鼠神经炎症及线粒体动态变化的影响研究将聚乙烯醇-聚丙烯酰胺水凝胶植入C5-C6椎板下间隙建立颈髓慢性压迫大鼠模型。术后连续4周,每日1次,予药液灌胃。前肢抓力、BBB评分
目的:明确补肾活血方治疗子宫内膜异位症的临床疗效和安全性;探索腹腔巨噬细胞和炎性因子在子宫内膜异位症模型小鼠进展过程中的动态变化特征以及腹腔粘连形成和异位灶生长的规律;研究补肾活血方对子宫内膜异位症免疫微环境的调控作用及腹腔粘连和异位灶生长的抑制作用;研究补肾活血方的有效单体姜黄素是否通过调控巨噬细胞极化影响子宫内膜间质细胞的侵袭和凋亡,并探索姜黄素对巨噬细胞的调控机制。方法:基于妇科门诊的临床常
背景脑卒中的发病率高、致残率高,上肢运动功能障碍是脑卒中后神经缺损的主要症状,早期康复治疗是改善脑卒中上肢运动功能的有效方法。早期对患者进行评估,准确预测患者预后,进而有针对性地采取对应的康复治疗措施,能更有效地促进功能恢复,提高日常生活活动能力。PREP算法(predict recovery potential algorithm,PREP)是一种预测脑卒中上肢运动功能恢复的预测模型,准确率为8
2020年以来,在线教育取得了显著成效,对我国教育的发展产生重要影响。但在线课堂中师生隔屏相望使师生缺乏情感方面的交流,造成教师情感支持服务质量不高,从而产生了一系列影响在线学习效果的问题。本文对485名具有在线学习经历的大学生进行了问卷调查,分别从关注学生、理解学生、信任学生、鼓励学生、尊重学生5个维度,分析了当前在线学习中教师情感支持现状,对不同学习者在感知教师情感支持上的差异、教师情感支持与