豆粕是大豆提取豆油后所得的一种副产品,是一种营养丰富、营养成分种类齐全、营养物质含量均衡的植物性蛋白饲料源。豆粕蛋白质含量高,特别是水溶性蛋白质占了豆粕中蛋白质的大部分,但由于这些水溶性蛋白质分子量大、结构复杂,如果直接将豆粕用于饲养动物,豆粕中的蛋白质被吸收利用的百分率不高,这样就造成豆粕资源的大量浪费,从而提高了饲养成本。根据多年来利用酶解法制备豆粕饲料的实际生产情况可知酶解法存在的限制因素也很多,主要是用于酶解法的酶的种类少,这样就大大限制了豆粕饲料业的发展;另外,由于用于水解反应的蛋白酶的种类少,这样就不能很好的降解大豆蛋白,使制取的大豆肽苦味不能根本脱除,从而影响饲料口感,进行动物饲养时导致被饲养动物摄食量大大降低。与酶解法相比,微生物发酵法具有缩短发酵周期,降低豆粕饲料的生产成本等优点,具有广阔的发展前景。固态发酵法可以实现更大规模生产,制备豆粕饲料的生产成本明显降低;固态发酵过程中基本无对环境造成污染的废物产生。因此,固态发酵法在饲料加工业中将占据越来越重要的位置。枯草芽孢杆菌固态发酵豆粕已从蛋白酶活角度进行过研究,未见既从蛋白酶活又从肽转化率角度利用枯草芽孢杆菌固态发酵豆粕的更深层次研究。根据枯草芽孢杆菌及曲霉在发酵过程中分泌蛋白酶的情况,为从更多位点将大豆蛋白更好的水解,进一步提高豆粕饲料的肽转化率,本文对枯草芽孢杆菌与黑曲霉或米曲霉混合发酵豆粕制备豆粕饲料从蛋白酶活及肽转化率两个角度进行了深入探讨,以期得到肽转化率更高、营养更丰富的豆粕饲料。主要进行了以下三方面的研究:⑴枯草芽孢杆菌1389、米曲霉3.042、黑曲霉3.350以及枯草芽孢杆菌1389分别与米曲霉3.042、黑曲霉3.350混合固态发酵制备豆粕饲料的动态发酵过程中蛋白酶酶活和大豆肽转化率等指标的测定。⑵通过对动态发酵结果的分析确定单因素条件,进行单因素实验。⑶进行正交试验对发酵条件进行优化。动态发酵过程中蛋白酶活及大豆肽转化率的变化如下:①枯草芽孢杆菌1389与米曲霉3.042混合发酵的蛋白酶酶活:48-72h蛋白酶酶活逐渐上升,并在72h达到最大值,以后蛋白酶酶活开始下降,最大值大约在690U/g。枯草芽孢杆菌1389与黑曲霉3.350混合发酵的蛋白酶酶活:48-84h蛋白酶酶活逐渐上升,并在84h达到最大值,以后蛋白酶酶活开始下降,最大值大约在400U/g。②枯草芽孢杆菌1389与米曲霉3.042混合发酵的肽转化率:48-72h肽转化率逐渐上升,并在72h达到最大值,以后肽转化率开始下降,并趋于平衡。枯草芽孢杆菌1389与黑曲霉3.350混合发酵的肽转化率:48h -86h肽转化率逐渐上升,并在86h达到最大值,以后肽转化率开始下降。在动态研究的基础上进行单因素实验,再通过正交试验,并以肽转化率和蛋白酶酶活为指标确定最佳发酵工艺条件,即:①枯草芽孢杆菌1389与米曲霉3.042混合发酵制备豆粕饲料的最佳发酵条件:接种时间差6h、发酵温度30℃、培养基含水量64%、菌种混合比例1:1,发酵时间72h。在此条件下测得发酵豆粕的蛋白酶酶活值在980U/g左右,大豆肽转化率在50%左右。比单菌种发酵的要好。②枯草芽孢杆菌1389与黑曲霉3.350混合发酵豆粕制备豆粕饲料的最佳发酵条件:接种时间差6h、发酵温度30℃、培养基含水量64%、菌种混合比例为1:2,发酵时间86h。在此条件下测得发酵豆粕的蛋白酶酶活值为390U/g左右,大豆肽转化率为45%左右。比单菌种发酵的要好。