随着我国海水鱼类的规模化养殖,病害发生日益增多,而治疗药物还主要是抗生素及其他抗菌药物。长期的抗生素及一些抗菌药物的使用使病原菌产生了较为明显的抗药性,防治效果不明显,而且造成了一定程度的环境污染。随着海水鱼类集约化、商业化的养殖,病害发生越来越频繁,迫切需要寻找新的抗鱼类病原菌的抗生素。本研究从海洋气候环境复杂、海洋生物资源丰富的南麂岛海域采集的海底沉积物中分离放线菌,并进行抗鱼类病原细菌的活性筛选,以期获得抗此类病原菌的活性物质,为开发新的抗鱼类病害的海洋新药打下基础。　　 采用稀释涂板法研究了南麂岛海域沉积物中海洋放线菌的分离技术,分析了真空干燥处理、热处理、海水浓度、培养基种类等因素对分离效果的影响；首次将羧甲基纤维素钠溶液(CMC)应用于海洋沉积物样品的预处理,探讨了不同浓度的CMC对海洋沉积物样品中放线菌分离结果的影响。并对所分离到的放线菌进行抗海洋鱼类病原菌活性菌株的筛选。采用打孔法和牛滓杯法,以海水养殖鱼类常见病原菌为指示菌,筛选出了一株活性较强的放线菌NJU0966。并对菌株NJU0966进行了发酵条件和发酵培养基的优化研究,主要研究结果如下:　　 对南麂岛海域海泥放线菌分离方法的研究发现,海洋沉积物经干燥处理、50℃热处理20min均能有效地减少细菌数量,利于海洋沉积物中放线菌的分离。浓度为60％的海水配制的培养基对海洋放线菌的分离效果优于纯海水所配培养基,并且培养基中添加海泥浸出液能有效地增加海洋放线菌的出菌率。以浓度为2g/L的CMC为分散剂时,不仅能良好地分散沉积物样品中的放线菌孢子,而且能明显地增加海洋放线菌的检出量及稀有放线菌的数量。　　 采用稀释平板法,从南麂岛海域海泥样品中共分离获到放线菌117株。以鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、创伤弧菌(Vibrio vulnificus)、灿烂弧菌(Vibriosplendidus)、溶藻弧菌(Vibio alginolyticus)、哈氏弧菌(Vibio Harveyi)、副溶血弧菌(Vibio Parahemolyticus)、需钠弧菌(Vibio natriegens)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)等海水鱼类常见病原菌及水体中的益生菌为指示菌,用打孔法对分离到的117株放线菌进行常见鱼类病原菌的初筛,共得到12株有明显拮抗性的菌株,主要对鳗弧菌和恶臭假单胞菌有拮抗性。再将这12株具拮抗性的菌株用牛津杯法进行复筛,得到一株抑菌圈直径较大的菌株,编号为NJU0966。对该NJU0966菌株的抗菌谱进行测定后发现,菌株NJU0966对多种病原指示菌有拮抗性,但对水体的正常菌群及有益菌群却没有拮抗性,说明该菌株的抗菌谱不是太广,对正常菌群没有危害,我们可以对菌株NJU30966进行后续的研究。　　 研究明确了菌株NJU50966的最佳发酵工艺和培养基组成,实验考察了海水浓度、碳氮源、发酵培养时间、发酵液初始pH值、温度、装液量、种龄、接种量和摇床转速等因素对菌株产抗菌活性物质的影响,并通过正交实验对培养基碳氮源进行了优化。确定菌株NJU0966最佳培养基组成为:黄豆粉0.5％,酵母膏1％,可溶性淀粉1％,葡萄糖1％,0.05％KH2P04,70％陈海水,30％的蒸馏水。发酵培养条件为:初始pH7.2,种龄48h,接种量8％,250mL三角瓶装液量75mL,28℃、200r/min条件下发酵培养5d。根据优化的发酵工艺,对实验进行了验证,所得发酵液的抑菌活性有了明显提高,抑菌圈直径比原来增加了约23.8％,有效提高了菌株合成抗菌物质的产量。