SiRNA干扰β-catenin信号通路在肝癌治疗中的作用及机制

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原发性肝癌是世界上最常见的十种恶性肿瘤之一,我国又是原发性肝癌的高发区。一旦发现多为中晚期,失去了手术机会,现有的治疗方法效果亦不理想。因此,长久以来肝癌的研究一直为基础和临床科研人员所关注。β-catenin是细胞质中一种重要的多功能蛋白,处于Wnt信号通路的活化中心,与形成肿瘤的多种因素密切相关,参与肿瘤发生、发展过程的多个环节。因此,本研究欲应用siRNA干扰β-catenin信号传导通路,以观察其对肝癌细胞生长、细胞周期、细胞凋亡相关因子、血管生成因子、端粒酶及其它信号通路的影响及siRNA能否用于肝癌的治疗。首先筛选能够有效沉默β-catenin基因表达的siRNA,然后用有效的siRNA转染入肝癌HepG2细胞,在不同的时间点用RT-PCR及western blot法检测β-catenin的mRNA及蛋白质表达,MTT法检测肝癌细胞的生长,72h和96h用流式细胞仪检测细胞周期。最后用western blot法检测细胞周期、细胞凋亡、血管生成因子、端粒酶及其它信号通路部分相关蛋白质的表达,用RT-PCR法检测VEGF-A、VEGF-C的mRNA表达。从而可知siRNA可以沉默β-catenin基因及蛋白质的表达,并使细胞周期阻滞于G0/G1期。一次转染可在一定时间内抑制肝癌细胞的生长,在肝癌的治疗中起一定的作用,但不能治愈肝癌。肝癌细胞中β-catenin信号传导通路可以调节肝癌的细胞生长、细胞周期、细胞凋亡、血管生成因子、端粒酶及其它信号通路等,从而抑制β-catenin信号通路在肝癌的治疗中起一定的作用。我们需要进一步深入研究,以了解肝癌的发生、发展过程,从而寻找更为有效的治疗肝癌的方法。
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