【摘 要】
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研究目的 建立大鼠后囊膜混浊(PCO)模型;应用基因芯片技术检测大鼠ECLE手术后晶状体上皮细胞(LECs)基因差异表达,为系统揭示PCO的分子机制提供理论依据;探索防治PCO的分子生
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研究目的 建立大鼠后囊膜混浊(PCO)模型;应用基因芯片技术检测大鼠ECLE手术后晶状体上皮细胞(LECs)基因差异表达,为系统揭示PCO的分子机制提供理论依据;探索防治PCO的分子生物学方法。 研究方法 (1) 12只SD大鼠随机分成4组双眼行ECLE,术后即刻、1d、7d、14d摘除眼球进行组织病理学观察,研究残留LECs增殖、移行和后囊膜的动态变化,应用方差分析比较LECs增殖数量。 (2) 20只SD大鼠随机分成4组,双眼行ECLE,分别于手术后即刻、1d、7d、14d处死大鼠完整取出囊膜,同组囊膜标本混合后Trizol法提取RNA,对样品RNA进行反转录和荧光标记,用含有5705个大鼠基因探针的oligo芯片分别检测术后1d、7d、14d与术后即刻组相比的基因差异表达;选取基因Bfsp1、Ccnd1、Cdk4、Cdkn1b、Cdkn2b进行实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)验证芯片结果。 (3) 48只SD大鼠随机分为3组,双眼行ECLE,术中前房内分别注入Ccnd1基因反义寡核苷酸(Ccnd1-ASON)脂质体、Ccnd1基因正义寡核苷酸(Ccnd1-SON)脂质体、无药脂质体溶液50μl;每组随机取4只分别于术后即刻、1d、7d、14d处死,完整摘出眼球,其中4只眼球行qRT-PCR检测LECs Ccnd1表达变化,4只眼球进行组织病理学和周期蛋白D1(Cyclin D1)免疫组织化学实验,应用方差分析比较LECs增殖数量和晶状体Cyclin D1阳性细胞积分光密度(IOD)值。 研究结果 (1) 所有大鼠均成功施行ECLE。术后即刻可见前囊膜下及赤道部有单层的
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