【摘 要】
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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种转录后基因沉默过程,在真菌、植物、无脊椎动物和哺乳动物中发挥抗病毒天然免疫功能。当病毒感染细胞时,其复制过程中产生的病毒双链RN
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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种转录后基因沉默过程,在真菌、植物、无脊椎动物和哺乳动物中发挥抗病毒天然免疫功能。当病毒感染细胞时,其复制过程中产生的病毒双链RNA(dsRNA)被宿主Dicer蛋白识别并加工,形成病毒来源的小干扰RNA(viral siRNA或vsiRNA)。这些病毒来源的vsiRNA被转运至Ago蛋白,形成RNA诱导的沉默复合体(RNA induced silencing complex,RISC),并介导与其同源的病毒mRNA的降解,最终导致病毒被清除,从而到达抗病毒的目的。然而,在长期的进化过程中,许多病毒也会形成了一种免疫逃逸机制,通过编码RNAi抑制子(VSR)来抑制RNAi,逃逸RNAi介导的抗病毒免疫。因此,如何阻断或者放大沉默信号成为病毒和宿主博弈的焦点。西门利克森林病毒(Semliki forest virus,SFV)属于披膜病毒科,甲病毒属,依靠蚊子进行传播。由于其微弱的致病性,因而成为该属的模式病毒。其他的甲病毒还包括辛德毕斯病毒(Sindbis virus,SINV)、基孔肯雅病毒(Chikungunya virus,CHIKV)等等。在本研究中,我们利用SFV感染埃及伊蚊细胞和人源细胞为模型,发现SFV的Core蛋白可以抑制RNAi。并且通过体外实验发现,Core蛋白通过与dsRNA和siRNA结合抑制RNAi通路,同时还能保护dsRNA不被Dicer切割。当关键残基K124/K128和K139/K142发生突变后,Core蛋白几乎丧失了结合dsRNA和siRNA的能力,而且突变病毒的复制能力也大幅减弱。总的来说,我们发现了一种新的VSR,并揭示其作用机制主要是通过结合dsRNA和siRNA来抑制RNAi。
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