克拉玛依石油污染土壤石油烃降解菌及其降解特性研究

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克拉玛依油田是大庆油田投入开发之前全国最大的油田,石油工业迅速发展的同时带来了许多环境问题,石油污染土壤的问题尤其严重。微生物修复技术是被公认为最具有潜力的石油污染土壤治理技术之一。通过对克拉玛依石油污染土壤10个站位土样的理化性质、微生物学特性进行考察,结果表明克拉玛依石油污染土壤含水率基本在1.89%5.33%之间,土壤偏碱性,营养水平较低,各站位土壤酶活性存在一定的差异。对克拉玛依石油污染区域共10个站位的石油污染土壤进行石油烃降解菌的多次富集和纯化,最终得到6株在45℃下降解率均在35%以上的降解菌6株;并使用现代分子生物学的手段对KL3-21进行种属鉴定,鉴定KL3-21为恶臭假单胞菌属(Pseudomonas putida);对筛选得到的高效石油烃降解菌KL3-21进行环境因素的考察,结果表明,最佳pH范围为68,最佳接种量为3%;低浓度的金属离子Fe2+,Mg2+和Ca2+均能提高菌株KL3-21的降解能力;过低浓度的吐温80对降解菌KL3-21没有明显的促进作用,浓度过高会降低其降解能力,最佳的投加量为2%。此外,考察了KL3-21对石油烃模式物的降解特性,实验结果表明,菌株KL3-21对正构烷烃模式物正十六烷和单环芳烃甲苯的降解能力最好(30d降解率分别达到99.53%和99.77%);对烃类衍生物邻苯二酚和多环芳烃萘的降解能力次之(30d降解率分别达到80.92%和87.23%),而对于多环芳烃(芘)的降解能力较低,只能达到23.70%。最后进行室内花盆实验,对生物修复的启动条件进行了摸索,探究在最佳启动条件下所筛选石油烃降解菌对污染土壤的修复效果以及土壤理化性质、微生物学特性和石油烃组成的变化趋势,实验结果表明,影响生物修复效果的主要因子为菌剂的投加量、水分含量以及鸡粪。最佳启动条件为(每Kg干土):菌剂投加量200mL,水分含量15%,鸡粪投加量120g,麦糠投加量50g,表面活性剂30mL。
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