合浦珠母贝在水产养殖中主要用于生产珍珠,而贝壳和珍珠均是典型的生物矿化产物。已有大量实验证实,多种基质蛋白在合浦珠母贝贝壳的形成中发挥了重要作用。因此,对于基质蛋白的研究也成为矿化机理研究的重点。然而,有关转录因子对基质蛋白调控机理的研究还处于探索初期。NF-кB信号通路在骨骼系统与免疫系统中均起到了重要作用,Pf-Rel作为Rel/NF-κB家族,被认为是该通路的关键转录因子,能够进入细胞核与DNA结合,从而调控下游基因的表达。Prismalin-14和MSI60分别在棱柱层和珍珠层的形成中发挥重要作用。本课题重点研究了Pf-Rel转录因子对基质蛋白Prismalin-14和MSI60的表达调控情况,并初步探究Pf-Rel转录因子对两种基质蛋白的调控机理。在本论文中,通过检测合浦珠母贝中贝壳肌、生殖腺、鳃、足、心脏、外套膜中心和外套膜边缘七部分组织中Prismalin-14和MSI60基因的相对表达量,我们发现二者在主要分泌基质蛋白的外套膜中表达量较高。此外,我们发现Pf-Rel,Prismalin-14和MSI60三种基因在贝壳损伤后都出现相对表达量升高的情况,并存在时间上的先后规律,表明三者在贝壳形成中均可能发挥了作用。我们使用RNAi方法将Pf-Rel基因沉默,发现Prismalin-14和MSI60基因的相对表达量均显著降低,证明转录因子Pf-Rel能够对Prismalin-14和MSI60基质蛋白起到表达调控作用。之后,我们将带有Prismalin-14和MSI60启动子的荧光素酶报告载体与不同剂量的Pf-Rel报告载体分别转染进入HEK-293T细胞,检测荧光素酶活性。我们发现随着Pf-Rel报告载体剂量的提高,含Prismalin-14和MSI60启动子的报告载体的荧光素酶活性也随之提高,证明Pf-Rel可以激活Prismalin-14和MSI60启动子。最后,通过启动子截短体实验,我们发现Pf-Rel在Prismalin-14启动子上的-1794bp到-1599bp之间存在激活区域,在MSI60启动子上的-2244bp到-1441bp之间存在激活区域。综上所述,Pf-Rel转录因子在Prismalin-14和MSI60启动子上存在激活区域,能够激活启动子,从而促进Prismalin-14和MSI60基质蛋白的表达。