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随着世界经济的发展,不可再生能源特别是石油、煤炭等天然石化燃料供不应求,能源与环境问题是全人类的共同问题,各国政府都十分关注对新的替代能源的研究。纤维素类物质是自然界中最丰富、最廉价的一类可再生资源,但目前这些资源并没有得到充分的利用,造成资源浪费和环境污染。纤维素酶能将纤维素分解为还原糖类,利于纤维素的生物转化,纤维素酶的活性是直接影响纤维素利用的关键因素。因此,对生产高活性纤维素酶的研究已成为生物质能源领域中的重要的研究课题。本论文通过筛选得到了优良纤维素酶产生菌绿色木霉D12和黑曲霉F-3,并通过单因素实验和响应面分析的方法对其各自的发酵条件进行优化。在此基础上,考察绿色木霉D12和黑曲霉F-3的液态混菌发酵实验的发酵条件,并利用PB实验和响应面实验优化其最佳培养基组成,以及对混菌发酵所产酶的酶解效果进行验证。结论如下：(1)介绍了纤维素酶以及纤维素酶高产菌株的选育方法和发酵工艺；阐述了纤维素酶在实际生产中的应用,纤维素酶研究进展及遇到的问题。(2)利用刚果红平板初筛和液态发酵复筛的方法选育出高产纤维素酶的绿色木霉D12,其最高酶活为0.62IU/mL。通过单因素实验和响应面分析法优化实验,得出最适宜绿色木霉D12液态发酵产纤维素酶的条件为发酵温度为30.4℃、发酵时间为121.2h、起始pH=4.85、接种量为5%(体积分数),在此条件下所产纤维素酶活为1.20IU/mL,比之前提高了93.55%。(3)通过分离和筛选,从实验室保藏的10株黑曲霉中筛选出产β-葡萄糖苷酶活较高的黑曲霉F-3,其最高酶活为3.26 IU/mL。通过响应面分析法优化实验,得出最适宜黑曲霉F-3液态发酵产β-葡萄糖苷酶的条件为温度为29.1℃、发酵时间为96.2h、起始pH=4.91,在此条件下所产β-葡萄糖苷酶活为4.97 IU/mL,较之前提高了52.45%。为下一步混菌实验提供重要的参考。(4)通过单因素实验确定了绿色木霉D12和黑曲霉F-3液态混菌发酵的发酵条件。接种方式：接入绿色木霉D12发酵48h后再接入黑曲霉F-3发酵72h；接种量比例：绿色木霉D12和黑曲霉F-3的接种量比例为3.0mL:2.0mL;发酵温度：30℃恒温培养48h之后29℃恒温培养72 h。(5)通过PB实验确定了玉米芯、蛋白胨、(NH4)2SO4、吐温-80和酵母膏五个因素对液态混菌发酵产酶影响显著,并考虑实验的经济性,选取玉米芯、蛋白胨、(NH4)2SO4和酵母膏四个因素进行进一步的优化。利用响应面分析的方法,并考虑实验结果,最终确定了混菌发酵的培养基组分为：玉米芯为20g/L、蛋白胨为1 g/L、(NH4)2SO4为4g/L、酵母膏为0g/L、麸皮为10g/L、微晶纤维素为20 g/L、K2HPO4为4 g/L、CaCl2为0.5g/L、吐温-80为5g/L。(6)采用绿色木霉和黑曲霉混合培养能大幅度的提高产酶活性,在上述条件下,混菌发酵,滤纸酶活最高可达2.14 IU/mL,β－葡萄糖苷酶活为6.52 IU/mL,与纯培养相比,绿色木霉D12的滤纸酶活提高81.36%,β-葡萄糖苷酶活提高359.15%；黑曲霉F-3的滤纸酶活提高345.83%,β-葡萄糖苷酶活提高32.06%。在优化后的条件下进行糖化实验,48h时达到最大糖化率,并验证了本实验混菌发酵生产的纤维素酶的酶解效果。