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热稳定抗真菌因子(Heat Stable Antifungal Factor,简称HSAF)是产酶溶杆菌(Lysobacter enzymogenes)的次级代谢产物。产酶溶杆菌对农作物的多种病原真菌具有拮抗作用,可以用于生物防治。HSAF能够抑制多种真菌和卵菌,有效地改变真菌形态,包括扰乱菌丝分化和诱导细胞壁增厚异常,抑制附着孢的形成和孢子萌发,有望成为新一代杀虫剂或抗真菌药物。1、通过形态学观察结果表明:C3菌株单生,革兰氏染色反应阴性,菌体杆状,无鞭毛,长度随菌龄大小有变化。LB平板上菌落颜色浅黄色微显绿色,透明至半透明,菌落圆形至不规则形,边缘光滑或啮齿状,菌落边缘可见稀薄扩散边缘,呈粘稠,可以滑行运动,液体培养粘质。菌株生长温度5-35℃,最适生长温度为28-30℃。生理生化试验结果表明:C3菌株可以水解蛋白、几丁质、淀粉,不能水解纤维素。接种5h后,菌体生长进入对数生长期。2、通过培养基优化设计,获得了C3菌株产HSAF的最佳发酵培养基配方(g/L):乳糖1、胰蛋白胨15、大豆蛋白胨4、NaCl 5、K2HPO42.5。抗生素HSAF摇床发酵的最佳条件为:种龄15h,接种量1%,初始pH7.5,装液量100mL/三角瓶(300mL),发酵温度30℃,摇床转速160r/min。3、HSAF 10 L发酵罐培养的最佳条件为:发酵罐搅拌转速150r/min,通气量为6 mL/min,初始pH7.5,发酵温度30℃。发酵结束后,用(NH4)2SO4沉淀发酵液,离心,用甲醇萃取沉淀。用硅胶柱层析、LH-20凝胶柱层析、HPLC、PTLC等手段对甲醇萃取物进行分离纯化,得到黄色粉末。经鉴定为HSAF。4、C3菌株发酵液理化性质测定表明:其发酵液对温度、紫外线、自然光、酸碱有较好的耐受性,稳定性比较高。对实验室保藏细菌、真菌打孔法做抑菌谱,结果表明对革兰氏阳性菌有抑制作用,对阴性菌没有抑制作用;对某些真菌抑菌效果明显,对酿酒酵母没有抑制作用,抑菌谱较广。通过影响菌丝生长的实验表明:C3菌株能显著抑制病原菌菌丝生长和孢子萌发,并对菌丝和孢子萌发后的芽管有明显致畸作用。