水稻瘤矮病毒三地分离物序列分析及其与介体亲和性的研究

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水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)是经黑尾叶蝉、电光叶蝉和二点黑尾叶蝉等传播的呼肠孤病毒科(Reoviridae)植物呼肠孤病毒属(Phytoreovirus)的成员。由其引致的水稻瘤矮病自1976年在中国广东省高州县发现以来,发生范围不断扩大,1981年开始在广东的湛江地区发生流行,1991年在广西的北流县大规模发生,1995年在云浮地区大面积发生,2001年开始在兴宁地区流行发生,本实验室2014年-2015年在广东河源、梅州、韶关以及海南三亚和琼州等地调查亦见水稻瘤矮病株。由此可见,水稻瘤矮病在中国的发生范围不断扩大。水稻瘤矮病发生区域不断扩大的原因是一个重要科学问题,也是生产上急需回答的现实问题。为了阐明该病毒不断扩散的原因,我们开展了一系列研究,研究主要内容和结果如下:1、2014年-2015年对三个地区的水稻瘤矮病发生情况及介体叶蝉种类和数量进行调查。调查发现水稻瘤矮病的发生程度以及介体叶蝉的种类和数量存在较大差异,其中三亚地区发病很轻,主要叶蝉种类为二点黑尾叶蝉和电光叶蝉,用捕虫网扫网10下可见1-2头和0-1头;罗定地区发病较重,主要叶蝉种类为黑尾叶蝉和电光叶蝉,扫网10下可见10-20头和5-10头;兴宁地区发病较重,主要叶蝉种类为黑尾叶蝉和电光叶蝉,扫网10下可见10-15头和10-15头。2、比较不同种类介体叶蝉对RGDV三地分离物的亲和性。结果显示电光叶蝉对RGDV的亲和性最高,黑尾叶蝉次之,二点黑尾叶蝉最低。3、比较不同地理来源的介体叶蝉与RGDV各分离物之间的亲和性。结果发现相同地理来源的介体叶蝉与病毒具有相对高的亲和性,我们推测病毒发生了与介体亲和性相关的变异,从而有利于病毒更易在当地流行发生。4、对三个地区RGDV分离物进行全基因组测序,并对其12个基因组分核苷酸序列及其编码蛋白进行分析,根据编码蛋白氨基酸种类和数量的差异,推测可能该蛋白功能造成的影响。结果显示三地主要外壳蛋白P8的氨基酸序列完全一致,次要外壳蛋白P2存在一定差异;病毒原质形成蛋白Pns7、Pns9和Pns12以及管状结构形成蛋白Pns11均存在一定差异,根据前人对各蛋白功能的研究,推测以上蛋白均可能对亲和性造成一定影响。综上所述,本研究通过介体亲和性试验以及对RGDV三地分离物测序结果分析,初步建立病毒的遗传变异与介体亲和性之间的联系,并部分解释了RGDV不断扩散的原因。
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