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目的: 通过观察鼻咽癌患者发生肺转移的治疗方案及各项预后指标,对结果进行分析讨论。同时通过基础实验建立鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma, NPC)的肺转移可视化动物模型,构建肺转移细胞株,检测相关的差异基因,根据文献及实验结果进行筛选后进行验证。 方法: 收集2011年1月至2016年12月到温州医科大学附属第一医院就诊的鼻咽癌患者发生肺转移病例44人,其中诊断鼻咽癌以病理学报告结果为准,诊断肺转移以增强C T影像学报告为主,患者中男性38人,女性6人,中位年龄51.5岁(17-81岁),治疗上进行放疗加化疗26例,单独化疗13例,单纯放射治疗3例,未治疗2例。运用统计学软件SPSS中的Kaplan-Meier公式计算生存率,用 log-rank检验各组生存率。采用Cox逐步回归模型进行多因素分析。同时采用中科院购买的鼻咽癌细胞株CNE,构建稳定表达荧光酶基因的CNE/Luc稳转细胞系,尾静脉注射CNE/Luc悬液到裸鼠中,利用动物活体成像系统筛选得到肺转移裸鼠,分离肿瘤细胞,进行2次尾静脉注射筛选得到肺部转移的肿瘤细胞,运用荧光成像验证其组织特异性转移后,通过基因表达谱芯片技术,获得鼻咽癌肺转移相关的差异基因。 结果: 通过统计学分析全组患者1、2、3年生存率分别为65.9%、45.5%、29.5%,中位生存时间为25.33(0.24?97.2)个月。分成5个因素进行分析,年龄(大于60岁或小于等于60岁),治疗方案(放疗加化疗26例,单独化疗13例,单纯放射治疗3例,未治疗2例),化疗药物方案(一线药物23例,二线药物9例,靶向药物7例),转移器官数目(多器官包括肝脏,骨骼等转移患者32例,单纯肺部转移患者12例),经过log-rank单因素分析显示,年龄(P=0.5659)和性别(P=0.7598)不足以成为鼻咽癌肺转移患者预后的影响因素,转移器官数量(P=0.0044)是鼻咽癌肺转移预后的影响因素。采用C o x逐步回归模型多因素分析显示,治疗方案( P=0.0005)、化疗药物方案(P=0.0055)是鼻咽癌肺转移预后的重要影响因素。化疗药物方案中以靶向药物治疗为主的方案预后明显优于其他药物方案。根据靶向药物治疗有效的思路进行实验设计,通过构建动物活体成像的鼻咽癌肺转移相关模型。之后利用基因芯片技术,构建鼻咽癌原代细胞株CNE/Luc与鼻咽癌肺细胞转移相关亚群CNE/Luc-2的基因表达谱。通过Pubmed文献搜索以及相关基因分析软件,从而筛选出可能与鼻咽癌患者出现肺转移关系最为密切的前10种基因,并寻找这些基因在文献中已被证实与肿瘤发生相关的机制。这10个基因分别是 TP53,PIK3CA,MET,KRAS,VEGFA,EDNRB,GSK3B, FOXO3,SOD2,BIRC3。之后通过实时荧光P C R技术验证后证明此10种基因在鼻咽癌肺转移细胞中都有高表达,且以计算AACt代表目的基因相对对照基因的相对扩增倍数,可见其中高表达的基因以VEGFA、KRAS、TP53三者为著。 结论: 在鼻咽癌发生肺转移的患者中,转移器官数量,治疗方案,化疗药物方案是影响转移性鼻咽癌预后的独立因素,在化疗药物治疗中又以基因靶向药物的治疗效果最佳。本文通过成功构建动物活体成像模型,基因芯片技术以及文献查阅法筛选出TP53,PIK3CA,M E T等10个基因,推测这些基因可能对于鼻咽癌的肺转移有重要的调节作用。经过实时荧光PCR技术分析验证其确实在鼻咽癌肺转移细胞中具有高表达,为下一步验证鼻咽癌肺转移发生的相关信号通路研究提供理论基础,对于靶向药物治疗的研究亦有重要指导意义。